珍珠母贝加工废水中分离凝集素与其性质应用的研究.pdfVIP

·256· 无公害农业生态系统与农业可持续发展国际研讨会论文集 珍珠母贝加工废水中分离凝集素 及其性质应用的研究 丁力筠1 苏 欣1 苏拔贤2 陈 情2 叶丽香2 (1美国Mazgutte大学洛杉矶分校化学系； 北海画发海洋生物工程技求研究中心 北海 536000) 摘要：经硫酸铵反抽提与2．5％戊二醛固定的兔缸细胞亲和吸附两步，把珠母贝凝 集素从珠母贝外套腔液中提取出来，提纯倍数迭734倍。纯化的珠母贝凝集素经disc— PAGE显示出一条蛋白带；SDS一巯基乙醇处理后，经SDS显示出两奈亚基带． 分子量分别为67600和59500。等电聚焦测其等电点为pI一{．1。在已测定的15种糖中， 证明珠母贝凝集素的专一性糖是N—Z酰神经氨醴。在已试验的9种动物血中，其供血动 物种属专一性是兔血和猪血，对兔血的凝集活力强于猪血。珠母贝凝集素的热稳定性较 好．在30C下放置l小时，活力不改变；在60C一70C下保温30分钟，活力逐渐下降了 40“。其pH稳定范围在pH5——9。EDTA、柠檬酸钠可逆抑制珠母受凝集素活力，但 Ca抖可恢复其活力。珠母皿凝集素是一种低搪的糖蛋白，台糖量为2．9％。本文还报告了 用甲醛法，戊二醛法将珠母贝凝集素、文蛤凝集素作为配基，偶联到甲壳质和DEAE一纤 维素载体上．对人绒毛膜促性腺激素进行亲和吸附分离的研究。 目前巳知被纯化的几百种不同来源的凝集素中，对唾液酸专一性结合的凝集素数量 较少。它们主要分布在：①微生物如大肠杆菌、流感病毒和肺炎枝原体等；②无脊椎动物 如蝎子、海蟹、鲎娄、牡蛎、蛞蝓、蜗牛等；③哺乳动物的肾脏和子宫；④植物的小麦胚和海 绵等。而现在越来越；证据表明，凝集素在生物体受精、组织发育、机体对外界病原体侵 害的防御等重要过程中起着细胞问的分子识别作用。 一般来说，对唾液酸专一性的凝集素都是糖蛋白质，常需要Ca2+才能发挥其细胞凝 集作用。如流感病毒凝集素含糖量高达25“．鲎(IJ[mus po[yphemus)凝集素I。PL也是一 个含糖酸性蛋白，并由】8—20个分子量约为20000道尔顿的2种亚基构成，另一种对唾 液专一性的印度鲎凝集素CNS也是大分子糖蛋白．它与专一性糖结台时，能产生光物理 效应，蛞蝓凝集素I，FA通过超离。及凝胶过滤相互验证，其分子量是44000道尔顿，而 无公害农业生态系统与农业可持续发展国际研讨会论文集 ·257· SDs一电泳只得到一奈分子量为22000道尔顿的匹带，也说明I．FA是2种亚基组成．而 且通过还原荆处理观察到亚基之间无～s—s一变联。我们的工作亦证明文培凝集素也基 本上由=蒂亚基组成。 与抗体不同．对糖专一蚀不同的各种来源的凝集素在结构上没有相似之北．它们的 理化性质及生理功能上有许多问题．追夸仍未阐明。贝类凝集素研究工作较少．尤其迁对 唾液醢专一性的凝集素的报告更少。本文作者在1986年时广西沿海十三种常见蛆类凝 集素初步研究厦1992年时文蛤凝集素MMI．纯化以厦对癌变细胞的杀伤作用的研究二 作基础上，在珍珠贝母加工废水中对其所舍的凝集素进行纯化及一睦质、应用研究结果的 首挺报导。 ? 关键词：凝集素 亲和吸附糖蛋白 分离 唾液酸 ofa Isolationandcharacterizationnovelsialic martensii lectin(Pinctadalectin)and acid。——binding its ication appl SuXinlSuBaxian!ChenYin2Ye Lijunl Lixiang二 Ding (1 Univ