毛细管电泳用于生物碱PKb地研究.pdfVIP

2001年增刊 分析试毅室 Vot.20.Suppl 2001年It月 ChineseJournalofAnalysisLaboratory 2001-11 毛细管电泳用干生物碱PK、的研究 张 兰，陈国南 (福州大学化学化工学院，福州350002) 摘 要:根据淌度(脚一’)与川【或[011」一’成线性关系，建立了毛细管电泳一安培检洲法同时侧定0种生物峨:苯异丙胺、 笨丙醉胺 麻黄城、甲基麻黄城电离常数的测定方法.与传统的电位法和萦外分光光度法相比较，具有简单、快速和徽 1的特点，方法准确、可布. 关盆词:毛细于电泳，安培检浏法，生物峨，PG 中药是中华民族之瑰宝。生物碱存在于许多 公司，实验中所有试剂均为分析纯，水为二次蒸 科、属中草药植物中。四种生物碱:苯异丙胺 馏水。 (BZD)、苯丙醉胺(PPA)、麻黄碱(EPD)、甲基麻 2.2实验方法 黄碱(MEW 均为弱碱，弱酸弱碱的电离常数测定， CE-AD法:取一定体积的lmg/mL的BZD, 一般用电位法和紫外分光光度法川。生物碱由于 PPA,EPD和HEPD混合液，加入中性标记物苯酚 水溶性较低，用电位法测定灵教度达不到要求; 后，用与测定运行液相同PH值、IOmmol/L的翩 如果采用紫外分光光度法，对于一系列物质则需 砂缓冲溶液稀释20倍，分别在PH9.0,9.2,9.4, 逐一进行检测，非常繁琐。毛细管区带电泳(CZE) 9.4,9.6,9.8,10.0,10.2(缓冲液pH值选择 由于其分离模式的本身特性，己被用于弱酸弱碱 在pKa土1范围，可减小测定误差)进行电泳分 电离常数的测定川;更由于其搜长生物大分子的 离检侧，检侧电位为1000MV,混合样品每个PH点 分离，对于多种生物碱碱性 p〔Ka或pKb)的批量 连续侧定3次，检侧沮度为250C士0.50C.电泳 测定，相信与紫外分光光度法相比较，要快捷、 条件:未涂层石英毛细管50Cm、25Nm;电动进 简便得多。 样:15kVx7s:分离电压:15kV:分离介质: 1.CE-AD测定pKa的线性模型 50mm01几的翻砂缓冲溶液。 在电泳过程中，由于电离平衡速率远大于电 分光光度法:取一定体积的lmg/mL的BZD 泳速率[r1，因此在一定pH的级冲溶液中。A一的有 母液，分别用0.lmol/L的HCl和NaOH稀释，在 效消度(同可表示为完全电离的A绝对消度(间 波长210nm处检侧BZD溶液的CHA」和 A〔-〕的 乘以分布系数(a，即: 吸光度A。和A}-:另取一份母液分别用9.2,9.4, 9.6,9.8,10.。、10.2稀释一倍，以同样方法测 J)o= a 协 定BZD吸光度A.侧定沮度:250Cf0.50C.分 将:a二一[4匕 代入上式 别以PPA,EPD和VEPD代替BZD重复以上步软， [xq+[A] 侧得PPA,EPD和MEPD溶液的吸光度A,A，和 得:.止一二一互竺L十上 As. 尸甲 肋#·， 产A 3.结果与讨论 因此:晰一，与川〔或0〔Hr，成线性关系，因而Ka 3.1电泳介质的选泽 可以通过1++对【洲〔rL作图的斜率和截距求得， 电泳介质的性质和酸度强烈地影响粉毛细管 即截距与斜率之比等于Ka.K;.