肝癌中端粒酶活性异常、P-%2753-基因突变、RB基因与增殖细胞核抗原研究.pdfVIP

2002·重庆 全国生物治疗学术研论会 肝癌中端粒酶活性异常、P53基因突变、RB基因 及增殖细胞核抗原研究 (江苏省南京市)南京师范大学生命科学院(210097) (江苏省启东市)启东肝癌研究所(226200) 陆东东 、L 目 探讨逮们在原发性肝癌发生、转移和浸润中的作用及相互关系。 1对象与方法 PCNA单抗，生物素标记的二抗均购自北京中山生物技术有限公司，SP试剂盒为ZYMED公司产品。 按说明书严格操作。 标记指数(LI)=阳性细胞数／500(双盲法，记数500个肿瘤细胞，5个高倍视野，取得均值)。 1．4统计学处理 采用X2检验，t检验，Spearman等级相关检验。 2结果 2．I端粒酶、P“、llB、PcNA在肝癌中表达情况见表i。 中胃医药生物技术协会·中嗣抗癌协会 全国生物治疗学术研论会 2002·重庆 表1端粒酶、P53、RB在肝癌中的表达 料P0．Ol半P0．05 2．2端粒酶、P“、RB表达与PCNALI关系见表2。 表2端粒酶P”、RB与PCNALI表达间关系(X+S) 岬(O．ol(与阴性组比较) 2．4端粒酶、P53、RB、PCNA与肝癌分化、浸润、转移的关系见下页表3。 3讨论 为越来越多研究所证实。端粒酶、P”、RB基因表达的蛋白在肿瘤细胞永一化过程中起重作用。 本研究显示，端粒酶在肝癌中阳性率显著高于癌旁组织。P”、RB基因表达蛋白阳性率显著低于癌 旁组织，提示端粒酶激活，P”、RB表达蛋白的缺失，在肝癌发生中起重要作用，是良好的肿癌标记物。 PCNA在肝癌表达增强、分布显异质性，提示肝癌细胞生长调节失控，DNA合成紊乱，也反应肿瘤增殖细 胞群中并非所有细胞均同步增殖。在肝癌组织中端粒酶阳性、P”、RB表达缺失，其PCNA表达明显增多 是促进细胞增殖重要因素之一。 中国医药生物技术协会·中国抗癌协会 123 2002·重庆 全国生物治疗学术研论会 表3端粒酶、P“、RB、PcNA表达与肝癌分化、浸润、转移关系 注：△按UIC和AJcc公布TⅢ分期标准。岬0．叭 P”、RB蛋白是一类负性细胞周期的调控蛋白，控制细胞增殖，使细胞停滞于G1期，相关分析证实 P”与RB表达间存在显著负相关性。同时，这一结果也证实了P”、RB基因表达蛋白调控肝癌变的机理 是一个负反馈环路，在此反馈环内，P53、RB表达蛋白任何一种表达缺失，都将导致调节环路中断，造 成细胞异常增殖，而导致肝癌发生。 调控细胞永生化的端粒酶和P”蛋白在肝癌中表达呈显著的负相关性。提示P”蛋白表达缺失结合端 粒酶激活，可能在肝癌发生上起着十分重要作用，与肝瘤发生的端粒一端粒酶假说相吻合。有人报道端 粒也能通过非依赖端粒酶途径得到延伸。本研究发现，肝癌组织中。端粒阴性往往伴有P”的高表达， 其意义尚不清楚。有人在角质细胞和乳腺上皮细胞的永生化研究中提出，P／RB通路失活或P”表达下 调结合端粒酶活性增强导致上皮细胞永生化的致癌理论。本研究中，P53／RB失活组端粒酶表达阳性率显 端粒酶激活密切相关。可能是肝癌癌变的重要通路之一。 参考文献 1．Dodnoc of introductionoftelomernesintohuman AG．Extension life—spanby cells．Science1998：279：3