激光解吸电离质谱新型液相基质的研究.pdfVIP

第20卷增刊 分析测试学报 V01．20 FENXICESHI ofInstrumental 2001年7月 XUEBAO(Journal Jul．2001 Analysis) 激光解吸电离质谱新型液相基质研究 熊少祥1，陈文章2，蒲丹1，辛 斌1，王光辉1 (1．中国科学院化学研究所分子科学中心北京质谱中心，北京100080； 2．中国矿业大学化工与环境工程系，北京100000) 多种化合物作为基质或辅助物，以甘油、硝基苄醇、液体石蜡等为溶剂，形成了多种不同组成的液相基质。 以多肽、蛋白、大环寡糖、小分子有机化合物等为测试样品，系统地考察所用液相基质对各种类型化合物的 化合物具有较好的通用性，而有的液相基质对某些特定类型化合物的分析特别有效。 1 实验部分 所用仪器为BIFLEXm型MALDI—TOF质谱仪(Broker 醇等溶剂，构成不同组成的液体基质。选择多肽、多糖、蛋白、杯芳烃、酰基化寡糖、卟啉、聚甲基丙烯酸丁 酯等多种化合物作为测试样品。 于200 pL离心管中，将样品与液相基质溶液混合均匀，取约0．2弘L混合物溶液，溶加在样品靶上，送入 质谱仪。待整个系统处于合适的真空条件下，进行质谱分析，累加20～100次单次扫描信号得到质谱图。 2结果与讨论 2．1 液体基质溶液浓度的影响 与固相制样法不同，液相基质呈溶液形式存在，基质在溶剂中必须具有一定的浓度，方能在质谱测定中 得到高分辨率、高灵敏度的信号。而常用的基质化合物多为弱酸性，在溶剂中溶解度较小，为了增加溶解 度，采用加入碱性化合物为助溶剂(如3AQ、丙二胺、多胺等)，促进了基质的溶解，增加了基质的溶解度，在 近饱和的基质浓度下，得到较佳的质谱分析结果。 2．2样品溶解度的影响 样品在液相基质中具有一定的溶解度是得到检测信号的前提，若样品与液相基质不能有一定程度的互 溶，则无法得到质谱分析数据。因此，根据被测样品的酯溶性或水溶性特征，分别选用甘油为溶剂构成分析 水溶性样品的液相基质，或以硝基苄醇为溶剂构成分析酯溶性样品的液相基质。实验结果还表明：以甘油 和NBA的混合溶剂配制的液相基质，对大多数类型化合物都有很好的相溶性，可以得到较好的分析结果，增 加了相应液相基质的通用性。 2．3实验条件及仪器参数的影响 采用液相基质对样品进行液相制样，固体制样时的仪器参数已不适用于液相制样条件。通常需要增加 延时引出电压和延时引出时间，才能使测定结果得到改善，同时，液体制样条件下所使用的激光强度要大 15％以上才能得到检测信号。这说明液相制样与固相制样在样品分子的解吸电离机理上有所不同，样品进 入仪器后，可能会在其表面形成一层液膜。选用较强的激光，才能打破液相基质的表面液膜，形成局部过热 的熔化区域，样品分子才得以解吸电离。但是，一旦此微小区域形成，液体内部的样品分子则不断向其表面 迁移，因此能得到长时间稳定的检测信号，同一样品点激光轰击近千次后，信号并未衰减。 基金项目：国家科学技术部专项经费、国家自然科学基金20035010)资助课题 分析测试学报 第20卷增刊(2001) 与固相制样方法相比，液相制样方法所得质谱峰的分辨率没有明显的下降。如图1a(图略)中多肽混合 物质谱图中的放大部分所示，使用液相基质仍然很容易获得了7000以上的分辨率。而且，利用液相基质样 品信号稳定性强的优势，通过增加扫描次数，使质谱峰的信噪比得到进一步的提高。 2．4各种液相基质体系的比较 多种类型的化合物样品分析结果表明：与固相制样方法相同，以CHCA为主要成分的液相基质，在本文 所考察的多个液相基质体系中，仍具有最强的通用性。DHB液相基质的通用性稍差，但仍可对多种类型化 合物给出优良的信号。采用纳米粉末作为基质有望克服有机化合物基质背景峰干扰的弊病。以2种纳米颗 粒材料悬浮于甘油等溶剂形成的液相基质制样时，许多种类化合物都得到了有效的检测。多聚酸是一类用 质谱方法难以分析的化合物。