黄色短杆菌变异株AN78的发酵生产L-精氨酸地研究.pdfVIP

全田发酵行业新产品、新工艺、新设备、新技术展示交流会论文集 隰蠢瀚鬻熏瓣l 黄色短杆菌变--Fr-株AN78的 发酵生产L一精氨酸的研究 上海市工业微生物研究所 苏令呜王宜敏李爽 摘要：以黄色短杆茵(BM4_l：metefium 较，分别提高了95％和39．3。发酵液中L一精氮酸的提取收率为71％，精氨酸成品质量符合 国家药品标准。 关键词：氨基酸发酵L一精氨酸黄色短杆茵诱变育种 L一精氨酸是人体和动物体中的半必需氨基 较，分别提高了95％和39．3％。 酸，在医药工业上具有广泛用途。精氨酸是配制氨 基酸输液、复合氨基酸制剂、肝功能促进剂、头发 一、材料和方法 生长促进剂等的主要成分。精氨酸对血氨升高引起 的肝昏迷，对肠道溃疡，血栓形成．神经衰弱和男 1．1菌株 性无精病等有治疗效果o’3]。 黄色短杆菌(Brevibaeteaium 前文“1报道了黄色短杆菌(Brevibaeterium (AIIV～，TAT，sG。)作为诱变出发菌株。 Ih-mnAG77(AHV～，TA，sG。)在20L发酵罐1．2培养基 中，以葡萄糖为碳源．以玉米浆、硫酸铵等为氮源 1．2．1完全培养基(％) 的培养基中培养4d，产酸率可达31．39，l，对糖转 蛋白膝1．0，牛肉膏1．0，酵母膏0．5，NaC 化率14，5％。为了更进一步提高菌种的产酸率和 对糖转化率，我们根据有关文献报道“。】，以 基，再加入琼脂粉1．6％)，1206C灭菌20rain。 1．2．2基本培养基(％) AG77菌株作为诱变出发菌株。筛选His’、Pro‘、 Met一变异菌株；经亚硝基胍(IrrG)诱变处理和选 育，获得一株能够积累大量L一精氨酸的菌株 AN78(删～，TA，SC7，His)。A／q78菌株在 20L发酵罐中，以葡萄糖为碳源，以玉米浆、硫酸 20啊L；pH6．8—7．O(如果配固体培养基，再加 铵等为氮源的培养基中培养4d，产酸率可达61．1一人琼脂粉1．6％)，110屯灭菌2．5min。 l，对糖转化率20．2％，与诱变出发株AG77相比1．2．3选择性培养基(％)： 一59— {黧嬲蔫藁燃瀛羹 全国发酵行业新产品、新工艺、新设备、新技术展示交流会论文集 在基本培养基的基础上朴加强80．003，毫升水充分摇匀后，用581型光电比色计(65号 ProO．003，Met0．003；pH6．8—7．0(如果配固体培滤色片)测定发酵液中的菌体光密度(O．D)，用 养基，再加入琼脂粉1．6％)，110T：灭菌25min。蒸馏水作为空白对照。 1．2．4种子培养基(％) 1．6．2 pH值测定：用国产精密pH试纸 葡萄糖3．0，尿素O．25，玉米浆2．5， 1．6．3还原糖测定：采用改良的斐林氏试剂 KI-12P040．15，K2HPO,+38200．05，MgSO+7H200．04， 法。 生物素50ug／L，pH7．O一7．2，115℃灭菌15rain。 1．2．5发酵培养基(％) 1．6．4L一精氨酸定性测定：采用纸层析法， 展层剂用77％乙醇：二乙胺：100：I，层析后用茚 葡萄糖10一15，(N心j：S04～7，玉米浆2．5， 三酮一丙酮试剂显色”】。 KH2PO+010，IvlgSO+7风00．04，尿素0．1，生物素