K部分-LRS教案.pptVIP

K 原核生物的转录 K1 转录的基本原则 K2 大肠杆菌RNA聚合酶 K3 大肠杆菌s70启动子 K4 转录的起始、延伸与终止 K1 转录的基本原理： 转录概述： 起始 RNA 聚合酶结合到双链DNA上； 聚合酶在DNA 上滑动找到启动子； DNA 螺旋的解开 从起始位点开始合成, 该位点标为＋1。 延伸： 在RNA的3`加入dNTP; RNA聚合酶沿着5’? 3’ 延伸新合成的RNA链， RNA聚合酶自身则沿着反义DNA链从3’ ? 5’ 前进。 E. coli 聚合酶: a 亚基 核心酶有两个相同的a亚基； a 亚基由 rpoA 基因编码； a 亚基对于全酶组装必须； a 亚基尚没有发现明确的转录功能， 但是对于启动子的识别很重要。 β亚基由 rpoB 基因编码, 为核心酶的成分； β亚基被认为是RNA聚合酶的催化中心： b亚基可能包含两个结构域，一个负责转录起始，一个负责转录延伸。 s 因子 通过将核心酶对非特意性序列的亲和力的降低(104倍)，同时增加其对启动子的亲和力来帮助启动子的识别. 2. s 因子的结合将核心酶转变为全酶， s 因子在起始后当RNA链延伸到 8-9 nt时， s 因子会从全酶上释放下来。 3. 细胞内s 因子的数量只有核心酶的30％。 细菌噬菌体T3 和 T7 RNA聚合酶就是单链的多肽