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光谱仪器与分析 生物活性分子的拉曼光谱电化学研究 曹哓卫，杨海峰，王浙苏，孟晓云，吴霞琴，王桂华，章宗穰’ (上海师范大学化学系，上海2009．234) 生命现象中包含着许多电化学问题，电化学过程是生命活动主要的基本过程之一。表现 在生物体内进行的化学反应绝大部分是氧化还原反应，即存在着电子传递过程的一类化学反 应。因此研究生物体内电子传递机理对于揭示生命过程中相关化学反应的本质显得十分重 要。 为了分析和研究在生物分子的电化学反应中，发生在电极表面上的电子传递过程的微观 矾理，需要借助于原于和分子水平上的微观结构表征手段。自七十年代末以来，表面增强拉曼 Enhanf-eRaman 散射技术(Surface scattefing，SERS)已成为在分子水平上现场表征和研究“金属／ 电解质溶液”和“金属／真空”界面体系最为有效和重要的手段。近年来，基于SERS技术的拉 曼光谱电化学方法已开蛤在生物电化学体系的研究工作中得以应用。 为了研究一些重要氧化还原酶的电子传递反应机理以及其它一些生物大分子的SEES光 谱，作者已建立起了一塞电化学现场拉曼测试技术和研究方法。在此基础上+已对若干生物活 性分子的电化学行为开展了电化学现场的拉曼光谱学研究=电化学现场的拉曼光谱测酞是在 Super 用的基础上进行的．带有石英窗片的光谱电化学原位池的结构可以保证在测试过程中维持体 系的氮气气氛。通过对金电槛和银电极氧化一还原循环预处理方法的探索，寻求工作电极有 效的粗糙化方法以获得理想的SERS效应。 一、铜锌超氧化物歧化酶受促电子传递反应的拉曼光谱电化学 dismutase，SOD)是生物体内新陈代谢过程中一 superoxide 铜一锌超氧物歧化酶(copper，zinc 娄重要的氧化还原酶二SOD的功能在于催化分解生物体内在新陈代谢过程中产生的有毒害作 用的超氧阴离子，对生物机体起着重要的保护作用。近年来，我们对SOD的电化学行为嗣：展 r较为深人系统的研究，先后发现了L一半胱氨酸和腺嘌呤等对SOD的电子传递反应有显名 的促进作用。为了深人揭示这些促进作用的微观机制，作者应用电化学现场拉曼光谱技水分 别对SOD在L一半胱氨酸修饰金电极表面、SOD与腺嘌呤共存条件下的有关电化学过程加以 研究，已获得了初步结果。 图j是SOD在L一半胱氨酸修饰金电极表面的循环伏安的现场拉曼光谱。通过对所教得 的拉曼光谱及其对应的电化学过程的宴验结果进行分析，明确了SOD分子中处于活性位的cu —Nhis键的拉曼特征振动频率；并通过SOD还原态和氧化态的特征振动峰随电位扫描而呈现 ·通讯联系Lf：海巾离等。，：拨肯‘i科学基金f98u啪j、卜海巾白熬科学基金(97ZAIdOG4：RlJ：诲帅范太等．}年学术阜 金资助项目 第1期 光谱仪器与分析 的交替变化，扶拉曼光谱学的角度表征了SOD在该修饰金电极表面的准可逆的电子传递反 应． 。 图3恒电位下金电极表面SOD与腺嘌呤的拉曼光谱 光谱仪器与铲析 二、烟酰胺脱氢酶在银电极表面吸附形态的拉曼光谱电化学 nic(·tie．hideadenine 类r 烟酰胺脱氢酶l dinucle06de，NAD)是生物体内能量转换过张 泛存在的重要的氧化还原酶。 。II MI l_I MI”IIml !；l_】t 21 图4 NAll)在粗糙银电极表面吸附的电化学现场拉曼光谱 如图4所示，有关烟酰胺脱氢酶在粗糙银电极表面吸附的电化学现场拉曼光谱研究表明， 在电化学极化条件下，NAD以伸展的形态吸附在银电极表面。此时，分子中柔性的磷酸基团