人雪旺细胞促进人脐带间充质干细胞向神经方向分化地研究.pdfVIP

人雪旺细胞促进人脐带间充质干细胞向神经 方向分化的研究 陈有 冯世庆* 吴秋丽 周先虎 宁广智 刘举 冯洪永 周恒星 天津医科大学总医院 300052天津市 [摘要]目的 观察人雪旺细胞(hSCs)对人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)在脊髓损伤(SCI) 体内存活、分化的影响，通过分子生物学技术检测胶质纤维酸性蛋白 （GFAP）、髓磷脂碱性蛋白(MBP) 与高分子量神经丝蛋白(NF-H)的表达，描述其变化的时间特征。方法 分离、培养及纯化hUC-MSCs 和hSCs。取8周龄雌性Wistar大鼠60只，以ImpactorModel-Ⅱ型打击器制作脊髓胸10(T10)损伤 模型。实验随机均分为4组：DMEM对照组(A),hSCs移植组(B)，hUC-MSCs移植组(C),hUC-MSCs 与hSCs联合移植组(D)，各组分别于移植后1、2、3、4周取材。结果 免疫荧光染色显示，在人细 胞核特异性抗体(MAB1281)染色阳性基础上,D组可见MBP与NF-H染色阳性细胞，其它各组为 阴性。分子生物学检测显示，A组3种神经标志物在蛋白与mRNA水平的表达量随时间延长均逐渐 增高，且GFAP在移植后2周明显增高，而MBP与NF-H在移植后3周明显增高。与对照组相应时 间点比较，移植组MBP、NF-H的表达量较高而GFAP的表达量较低，其中D组的MBP、NF-H的 表达量最高，差异有统计学意义(P＜0.05)，但D组GFAP各时间点的表达量差异无统计学意义(P ＞0.05)。结论 hSCs可促进hUC-MSCs向神经元与少突胶质细胞方向分化并增强其对胶质瘢痕的抑 制作用。 [关键词]脊髓损伤；细胞移植；神经分化 TheresearchofneuraldifferentiationofhUC-MSCspromotedbyhSCs CHENYou FENGShi-qingZHOUXian-hu DepartmentofOrthopaedics,TianjinMedical UniversityGeneralHospital,Tianjin300052,China [Abstract]ObjectiveTodiscusstheinfluenceofhumanSchwannCells(hSCs)onthesurvivaland differentiationofhumanumbilicalcordmesenchymalstemcells(hUC-MSCs)inWistarratswithspinalcord injury (SCI);TodetecttheexpressionofGlialfibrillaryacidicprotein(GFAP),Myelinbasicprotein(MBP)and Highmolecularweightneurofilament(NF-H),describetheirchangesofthetime-dependentcharacteristic. MethodsFirstly,thehUC-MSCsandthehSCswereisolatedandpurifiedinvitro.Sixty8-week-oldfemale WistarratsweresubjectedtoT10SCIbyImpactorModel-Ⅱ typedeviceanddividedintofourgroups randomlyandevenly:DMEMcontrolgroup(A),hSCstransplantationgroup(B),hUC-MSCstransplantation group(C),co-transplantationgroupofhSCsandhUC-MSCs(D),Theinjuredspinalcordtissuesweretaken outat1,2,3,4weeksaftertransplantation. [Keywords]SpinalCordInjury;CellTransplantation;NeuralDifferentiation