生殖器上皮HPV感染皮损中p53蛋白表达与意义的研究.pdfVIP

第一届中国艾擞病性病防治大会论文集2呻1II．13～16 生殖器上皮HPV感染皮损中p53蛋白表达及意义的研究 撩兵潦平马圣清武玲慎 捕薹采用免疫组化方法对6倒鲍温样丘疹扁和9倒尖锐温疣生殖器上皮HPV感染皮捐进行了p53蛋白、p21蛋白和增殖细 囊厦舟质形成组舅异常增生有关系。 关t词HPV感染p53蛋白PCNAp21蛋白 近来研究表明，人类乳头瘤病毒(HPV)感染与1．2制片与染色方法常规石蜡切片．片厚5“m。 人类生殖器上皮鳞癌密切相关…，而1,53基因在细胞免疫组化染色采用HRP标记的链霉抗生物素一生物 的生长发育及肿瘤的发生中起重要作用【“，因此研 及抗PCNA抗体的浓度，以正常皮肤粘膜标本阴性 究HPv是否影响宿主细胞p53表达对了解HPV的 致癌机制很有意义。本实验选择了15份生殖器上皮 染色的浓度为工作浓度。以已知阳性的人Bowen病 标本作为阳性对照，以PBS缓冲液代替一抗作为阴 HPV感染皮损标本，通过观察其p53蛋白、p21蛋白 性对照。三种一抗的工作浓度分别为CM—l(1： 和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达特征，以了解p53 蛋白表达与HPV感染的关系。对p53蛋白表达在 HPV感染皮肤损害中的作用进行了初步的探讨。 染色前标本均经微波炉处理10分钟。用DAB显色． 1材料和方法 Harris氏苏木精复染援，观察结果，显微照相。 1．1材料 1．3判断标准 1．3．1 1．1．I标本：选择我科1988～1997年保存资料完 整，未经激光、冷冻等治疗的生殖器上皮HPV感染 互独立完成观察。细胞核内见到黄色或棕黄色颗粒 状物质沉着为阳性细胞。 皮损的石蜡包埋标本15份，其中鲍温样丘疹病(Bp) 1．3．2 6例；尖锐湿疣(cA)9例，以及生殖器部位的正常皮 ps3、口21、PCNA阳性细胞效：每张切片在高 肤牯膜标本(Ns)10例作为正常对照。标本均经HE倍镜(400×)下随机选择5个含表皮的视野，计数每 染色组织病理明确诊断。 个视野中阳性细胞数，取其平均数，作为该标本的平 均阳性细胞数。 1．1．2临床及病理资料：(1)Bp：6例，男性2倒。女 性4例．年龄23～40岁。(2)CA：9例，男性4例，女1．3．3等级标准：(一)束见阳性细胞；(+)平均每高 倍镜视野阳性细胞数20；(++)平均每高倍镜视野 性5例，年龄22～50岁。(3)Ns：10例，男性5倒，女 性5例，年龄20--73岁。 阳性细胞数≥20。 1．1．3试剂：所用试剂均由北京中山生物技术公司 2结果 2．1免疫组化染色结果 购进。过氧化物酶标记的链霉抗生物索(Strepta． 2．1．1 vidin／Pemxidase)免疫组化染色试剂盒(简称SPTM 试剂盒。批号：单抗．SP9002；多抗，SP9001)系美国 ZYMED公司产品。兔抗p53蛋白多克隆抗体CM— l系英国Castra PCNA皆阳性。口53阳性细胞多局限于表皮基底层 Laboratories公司产品。兔抗p21蛋 白多克隆抗体C一19系英国SANTACRUZ生物技或其上方，可见部分非典型性细胞核表达p53蛋白。 术公司产