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人新的大肠癌负相关基因的研究
郑树蔡心涵+曹江耿礼义郑雷张颜明施正政
中国医学科学院浙江分院肿瘤研究所
自1991年来我们应用减式杂交技术(Subtractive
肠粘膜与大肠癌之间的减式杂交，即通过eDNA—mRNA杂交，去除两种细胞相
同的转录产物保留那些由于差异表达而无法配对的cDNA,以结肠癌病人的“正常
减癌”的减式探针乾地反复四轮筛检，克隆那些正常大肠粘膜中表达而在大肠癌
降低表达或不表达的基因，建成了大肠癌负相关的cDNA文库，得到了46个克
编码其他基因。32个免疫球蛋白基因的cDNA克隆均于a和“键基因，无7链基
细胞骨架中间丝前体蛋白基因。另两个基因的序列与Genbank数据库有资料的同
源性较低。 ．?
该两个新基因已进行了结构、定位、表达及研鬼先分述如下：
一、SNC6(HSUl7714)
1．全长cDNA序列测定
为369个氨基酸。t
(序列)
39
2．定位研究
(1)染色体定位
22q13。(图4a、b)。
(2)组织学定位
该基因的表达发生在粘膜上皮，而癌组织区、肌层及其他间质均未见到明显的阳
达明显且均一，在癌细胞中，低表达甚至不表达，而间质与肌层未见到明显信号。
(图(5a、b)。
3．表达
对比较
’应用RNADot
Blot的方法，在12例大肠癌及其正常肠粘膜中表达，结果表
明：SNC6基因的表达水平在大肠癌中明显低于在同一病人的正常肠粘膜中，与已
知抑癌基因P53的杂交结果相似。
(2)SCN6基因表达水平
Dot
Blot的结果表明：在30
50例大肠腺癌及同一病人的正常肠粘膜的RNA
例患者中，SNC6基因在正常肠粘膜中的水平是大肠癌中的1．5倍以上，占60％
50)。说明该基因有大肠癌中存在着不同程度的表达缺隐。
相应配对的大肠癌组织中的表达(见表2)。
表2 SNC在大肠癌与正常肠粘膜中的表达(RT—PCR—ELISA法)
Case OD450nm
Value(SNC6／GAPDH)
No． NormalMu00$a Carcirumm
1 1．084土O．235 0．514±0．098
2 0．794±0．213 0，297±0．271
3 10．90±0．299 0．514±0．271
4 0．993±0261 0．418±0．215
40
(3)卧屺基因在其他肿瘤组织中的表达水平
急性淋巴细胞白血病和1例急性粒细胞白血病。SN06基因的表达水平在肺腺癌
(1／1)，食管鳞癌(1／1)中亦低于配对的正常组织。
，、
。(4)SNC6基因在大肠癌中的表达强度与淋巴结转移的关系
18例淋巴结阳性的大肠癌病人中，有lO例SNC6基因表达水平明显低于配
低，占18．8％(6／32)。两组之间有极显著差异(P0．01)。
二、SNCl9(HSU20428)
1．结构研究： ．
利用Northern
读框，故目前仍在进一步研究。(图6)。，
2．染色体定位 ，
situ
25区带上。(图7a、b)
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