胃肠道肿瘤脾虚证和p53、bcl-2、bax基因蛋白表达关系的研究.pdfVIP

大会交流 139 传统的炮制壁虎的方法是去除内脏后烘干，目前临床有鲜用并不去内脏的报道，对于生用效优还 是炮制用效优还有待于进一步研究。 周冬枝 吴苏冬 刘永惠 何群英 西安交通大学第一医院中医科(西安710061) 肿瘤的发生发展是多基因积累性改变的结果，多基因表达与中医的辨证有许多相似之处，为了探 证、异病同证中的差异表达，以及脾虚证与基因表达的相关性，以期从基因蛋白表达的角度揭示证的 机理、证型规律，阐释肿瘤脾虚证的物质基础。 材料与方法 1．病例选择 患者65例，结肠癌患者61例，根据《现代肿瘤学》的诊断标准，明确诊断为原发性进展期低分化腺 癌，均尚未行放疗或化疗。对照组l为胃肠功能紊乱经胃镜检查无胃粘膜病变者，共20例：对照组2 为胃肠功能紊乱经结肠镜检查无结肠粘膜病变者，共20例，均为我院2001年门诊患者。各组在年龄、 性别构成上无显著性差异，见表i。 表1观察对象年龄、性别构成比 2．中医辨证分型 在行内窥镜检查或手术前，对肿瘤患者进行中医辨证，选择脾虚型、血瘀型、湿热型为观察对象， 脾虚证参考全国中西医结合虚证与老年病专业委员会1988年制订的《中医虚证辨证参考标准》；血瘀 证参考1988年第二届全国活血化瘀研究学术会议制订的诊断标准；湿热型参考国家中医管理局‘中医 病证诊断疗效标准》辨证分型。并对各型主要症状进行定量分析计分，进一步将其分为脾虚组与非脾 虚组进行对比观察。 140 第九届全国中西医结合肿瘤学术缔附会论文集 表2肿瘤患者中医辨证分型情况(倒数) 3．实验材料 癌组织标本在内窥镜检查或手术切除癌组织时获取，对照组标本在内窥镜检查时获取，所有标 本均按照《中国常见恶性肿瘤诊治规范》要求取材，经10％福尔马林溶液固定，常规石蜡包埋，层 厚5u 疫组织化学超敏UltraSensitive’弋一P(鼠)试剂盒均购自福建迈新生物技术开发公司。 4．实验方法 石蜡切片常规脱蜡至水，按照试剂盒说明书进行操作。阳性对照：迈新公司所赠已知阳性切片。 阴性对照：用PBS缓冲液代替一抗。 5．结果判定 为浅黄色至深棕黄色为阳性细胞。采用半定量计分法，对每张切片阳性细胞比例及阳性细胞着色强度， 分别进行分级计分，然后根据两项计分之和确定其阳性程度，分为I级、Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级。其中阳 性细胞比例计数方法如下：用低倍镜选择三个背景最清楚，DAB显色对比最满意的区域，换高倍镜分别 计算各区域中每500个细胞中阳性细胞的数量，取三个区域阳性细胞的平均数为阳性细胞百分比。无 着色强度判定方法如下：不着色计为0分，染为浅黄色计1分，棕黄色计2分，深棕黄色计3分。 6．统计学处理方法 为显著性差异的界值。 结 果 1．不同肿瘤患者p53、bcl-2、bax蛋白的阳性表达率 表3不同胂癌患者p53、bcl-2、bax蛋白的阳性表达率 ”与对照组比较PO．01 大会交流 141 与非脾虚组比较PO．05 bax蛋白在胃癌及结肠癌的阳性表达率及表达水平均为脾虚组低于非脾虚组，但组间比较均无显著性差 (PO．05)。 3．脾虚患者在不同肿瘤中p53、bcl一2、bax蛋白的阳性表达率及表达水平 性差异(PO．05)，其表达水平亦无显著性差异(P0．05)。 4．症状积分与p53、bcl一2、bax蛋白表达水平的相关性 142 第九届全国中西医结合肿瘤学术研讨会论文集 墨!璺星星耋垂茎矍坌量!!!二!至旦塞姿查垩塑塑羞丝 Bcl一2蛋白 脾 虚 积 分 表达水平 2 ．3 4 5 6