短发夹RNA靶向沉默大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞IGFBP-3基因地研究.pdfVIP

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2017-08-14 发布于安徽
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短发夹RNA靶向沉默大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞IGFBP-3基因地研究.pdf

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mL和/或成熟卵母细胞数目≤4；(3)对照组20例，为男方和/或输卵管因素而卵巢功能正常的不孕患者；其中内异症组23例再根据成熟卵母细胞数目是否大于4枚，进一步分为卵巢反应正常组（内异症 A组，n=16）及卵巢反应低下组（内异症B组，n=7）。短发夹RNA靶向沉默大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞IGFBP-3基因的研究蒲小勇闻安民张仁礼李东广东省人民医院生殖中心(510080) 目的筛选靶向抑制大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSMC)中胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IG FBP-3)基因表达最有效的短发夹RNA(shRNA)，为基因沉默IGFBP-3治疗大鼠勃起功能障碍提供依据。方法构建4对靶向IGFBP-3的短发夹RNA(shRNA)质粒和阴性对照，体外原代培养 CCSMC，分6组：空白对照组、转染pGPU6/GFP/Neo-IGFBP-3(611)组、转染pGPU6/GFP/Neo shIGFBP-3 (526)组、转染pGPU6/GFP/Neo-shIGFBP-3(866)组、转染pGPU6/GFP/Neo-shIG FBP-3(710)组和转染pGPU6/GFP/Neo-shNC阴性对照组；转染48小时后各组分别用实时定量PCR 和westernblot方法检测靶向沉默IGFBP-3的效果。