金属胶束体系中双功能大环多胺钴（Ⅱ）配合物和DNA的相互作用研究.pdfVIP

2000年9月中国化学会全国第十届失环化学暨第二届超分子化学学术讨论套论文摘要集 成都 金属胶束体系中双功能大环多胺钴(II)配合物 与1)NAfl,J相互作用研究+ 向清祥’ 周 红。余孝其… 汪新艳“鲍锦库6 谢如刚”’ (a．四川大学化学系成都610064) (b．四川大学生命科学学院成都610064) 关键词 双功能大环多胺 胶柬DNA 模拟酶是设计与合成比天然酶分子简单且具有酶催化高教率与专一性的非蛋白分 子。其中，利用金属胶柬体系模拟生物体系开展化学核酸酶研究已成为近年活跃的研究领 域之一II J。由两亲性表面活性分子形成的动态胶体聚集体，能提供一个类似酶的疏水微环 境；同时将金属酶的简单模型引入胶束体系，既可利川金属离子的特殊作IIj进行催化水解 反应，又可利用胶束疏水作用、氢键和静电引力等作用力稳定金属配合物形成超分子体系． 核酸是生物体遗传变异的物质基础，其中DNA是绝人多数生命体的遗传信息的载体。 开展对DNA水解或裂解研究，不仅对阐明生物大分子结构与功能关系具有重要意义，而 且为设计针对DNA作用的新型药物打下基础。事实上，开展新型核酸酶研究，以应朋丁 治疗剂或分子生物学方面已成为当今研究热点(2·…。基丁以上考虑，我们设计台成了具有 金属胶柬特性的双功能酰胺型钴(11)配合物，在确认其催化裂解磷酸酯键特性基础上， 将其直接与质粒DNA作用．初步确认了其核酸酶专一性和高效性。 (0．66mm01)溶于20m!无水乙醇中．加入co(cH 缓慢蒸去乙醇．过滤，用冷无水乙醇洗涤，真空干燥．得红褐色固体。产率65．1％，m．P =160．162。C．配合物结构经元素分析，1R，FAB—Ms证实。 -f：： r n．c6H130CH2qHcHfp弋CH2牛HCH20c6H13_n 6H LN一叫 L n)作 ·国家自然科学基金(No和凹川省教委青年教师皋会资助项目 ．193— 羔垒尘生!卫一!望些兰全全璺苎±曼苎堑些苎墨苎三苎坚坌量些芏量查苎塑鱼堕查塑墨墨生塑 用，EDTA终止反应。刚琼脂糖凝胶电泳鉴定DNA的水解情况。 已知质粒DNA有三种拓扑学构象。它们分别是共价闭合环状DNA(1型)．开环DNA 构．开环DNA闻～条链断裂而失去超螺旋．线性DNA则两链同处断裂成为线型分子。它 们分子量相同．但因构象不同在琼脂糖凝胶中的电泳迁移率不同，迁移速度为：IIIIIIs4l。 因此我们通过电泳方法观察配合物对DNA作用情况，确认其核酸酶效果及专一特性。 1．配合物浓度对DNA的裂解影响：电泳后内有两条带，F面一条带(DNAl型)反虑 的DNA量随着加入配合物浓度增大而减少，相应地另一条带(DNAII弛)反应的DNA置 随配合物浓度的增大而增大，结果表明L—Co(11)配合物可以使超螺旋的DNA分子裂解为 0-4tool 开环DNA分子．配合物浓度在2．O×1dm。时仍具有降解活性．且降解效果与配合物浓 度呈对应关系。 2．反应时间对DNA的降解影响：取配合物与质粒DNA反应．分别在不同反应时间终I} 反应，取样电泳进行分析。结果表明反应的DNA屋随反府时间增加而减少直至消失．配合 物对DNA的裂解效果与反应时问也旱对映关系。 3．配体L与C001)形成稳定的配合物后，能通过嵌入与DNA连接，从而使参与了配台 的两个侧链羟基的亲核活性增加，进而进攻DNA中的磷酸一醑链骨架中的P=O。发生亲核 反应而使DNA裂解。同时由于配合物侧链较欧，故其疏水性较好，能在中性表面活性剂 Brij35中能很好的形成混合胶束．为DNA的裂解提供了t良女r的疏水性微环境。 该模拟酶的切割效率及切割位点的确定，有待进一步实验研究证实。