抗真菌多肽ＡＰＳ发酵条件的研究Ⅰ——菌株培养特征、发酵培养基和培养条件.pdfVIP

1 抗真菌多肽APS发酵条件的研究I ——菌株培养特征、发酵培养基及培养条件 触建国丛威‘欧阳藩 (中国科学院化工冶金研究所生化工程国家重点实验室北京100080) 裴炎 (西南农业大学) ： 摘要本文通过单因素实验和4交实验，研究了蜡状芹抱杆茸发酵生产抗真茸多肚APS的 影响因素及培养条件，并确定了蜡机芽孢杆茼SI发酵培蕹基． ． ， 关键词蜡状芽抱杆菌抗真茸多肽发酵 I引言 ‘ 危害农作物的病虫草害约有15叻多种，其中病害500多种，主要以真蔼病害为主。世界农 业每年因此损失达300～600亿美元j如何有效地防治，已成为世界各国保证粮食生产，稳产， 高产的重要课题[I·“。长期以来，生产上主要采用的化学防治手段，使生态环境受到了严重破 坏，人畜健康也受到了很大的影响‘3{。农用抗生素因其低毒，高效，选择性强，残留时间短． 对环境污染小等特点而被公认为是一种安全理想的、可以替代化学农药的生物农药，正日益受 到广泛的重视f一“。自50年代以来，世界各国开始致力于农用抗生素的开发和应用研究，一 应用了井冈霉素，科生霉素，庆丰霉素，多抗霉素，公主岭霉素，中生霉紊．武夷霉素等。 多肽类抗菌素是农用抗生素中的一种，主要来扫芽孢杆菌，多呈闭合环状．少数为线形， 仅少数抗真菌，迄今发现的抗真菌玮肽主要来自枯攀芽孢杆菌，文献综述表明：APS是一种由 蜡状芽胞杆菌分泌产生的新型抗真菌环状多肽，其射病原真菌的孢子萌发和菌丝的生长均具有 显著的抑制作用。本文拟通过对分泌APS的蜡状芽孢杆菌菌株sl的发酵条件的研究，为APS 。 的工业化生产奠定基础。 2材料和方法 ． 2．1材料 蛋白胨(上海东海制药厂产品)．胰蛋白胨(英国Hampshire公司产品)，酵母浸膏(上海 酵母厂产品)．玉米粉、麸皮、黄豆粉、尿素(市购)。 供试用菌株：蜡状芽孢杆菌S1(以下简称s1)，指示菌：黑曲霉，由西南农业大学生物 技术研究中心提供。 2．2方法 2，2．1菌株生长曲线的测定口】 本课题为农业部“九五”攻关项目． 213 于发酵培养基中。培养。一定时间后．将发酵液离心，取上清液，经以下流程获得纯化物质APS： 等电点沉淀溶液一离心一甲醇溶解沉淀，透析一真空冷冻干燥一层析一HPLC进一步纯化，获 得实验用纯品。 2．2．3APS抑菌曲线的测定” 2．2．4发酵液产素产量的测定【6】 2．2．5优化培养基所用的正交设计实验采用k(3·)正交设计，即每次实验测试4个因素， 每个因素测定3个水平．设置3个重复，取平均值作为实验结果。 3结果和讨论 ． 3．I温度和初始pH值对s1生长韵影响 O．16 O．14 —0．12 导0．10 一O．08