聚乙烯吡咯烷酮碘对病原体杀灭效果地研究.pdfVIP

聚乙烯毗咯烷酮碘对病原体 杀灭效果的研究 李天保赵增元王勇强任杰顺 山东省海水养殖研究所扬秀生 杨晓岩 王 颖 王淑君 乳山市对虾育苗场 宋万水 聚乙烯吡咯烷酮碘(PVP—I)是一种含碘有机消毒剂药物，具有广谱杀菌与灭活病 毒等作用。在国内外鱼类养殖中，使用该药防治鱼类病害取得了较好的效果．我们针对 PvP—I对两种弧菌和目前造成我国养殖对虾病毒性暴发性流行病的皮下及造血组织坏 死杆状病毒(HHNBV)(暂定名)的灭活作用以及不同环境条件下的药效进行了实验。具 体实验结果报告如下： 1．材料和方法 1．1材料 弧冀(Vibriospp．)：自患红肢病病虾体内用TCBS培养基分离获得纯培养，利用蔗糖 和不乖l用蔗糖菌株各一株。 病毒(HHNBV)：由中国水产科学院黄海水产研究所提供。 PVp--I：市售商品，有效碘含量18—21．5％。 培养基：2216E。 i．2方法 1．2．1对弧籀的杀灭效果 接种弧箧于试管斜面，于25C培养24小时后加生理盐水将菌苔洗下制成菌悬液。在 装有生理盐水或无菌海水的试管中定量加入上述菌悬液后，按照实验要求的浓度分别加 人PVP～I母液，室温下处理1小时，使用倾注培养法25C培养3天，检测药物处理前后 菌量的变化，计算杀菌率。 I．2-2不同环境条件下的药效 主要针对不同pH、盐度、温度、有机物含量对PVP～I的影响进行了实验。用稀盐酸 和氢氧化钠调节pHf冰箱、温箱调节温度；氯化钠调节盐度；蛋白胨调节有机物含量，实验 中用COD表示。操作方法同1．2．1。 1·2．3 PVP—I对HHNBV的杀灭作用 取无菌生理盐水加入PVP一1母液，使其浓度为100X10“有效碘，然后等量稀释使 15微升纯化病毒，处理Io分钟后加入硫代硫酸钠中和PVP—I。处理过程在低温下操 作·用此处理后的病毒悬液分别注射平均体长为8，76厘米的幼虾，对照I组注射与实验 组同密度的病悬液，对照I组注射实验组最高浓度的PVP—I与硫代硫酸钠的反应液， ·284· 注射量均为0．02毫升，观察各组对虾的发病及死亡情况。实验结束时，收集各组试验虾， 由黄海水产研究所提供核酸探针并对样品进行病毒携带情况检查。 2．结果 2．1对弧菌的杀灭效果 表1 PVP--I在生理盐水中的杀菌效果第一次实验 有效碘浓度×10川 O 0．3 0S I．O 处理前茁量(cfu) 1．o×106 1，oXl06 1．o×10i 1．o×105 处理后苗量(ctu) 9．7×10s 5．6×10‘ 1，6xl” 1．2x103 杀菌率炻 04．2 98．4 999 (cfu芎细菌数／rod 裹2 PVP—I在生理盐水中的杀菌效果第二次实验 有敢珙浓度×lo-6 O3 O．5 1．O 处理前苗量(cfu) 9．6×105 9．6×10s 9．6×105 96x10s 处理后苗量(cfu) 9．7×105 4．9×10‘ 1 2×10● 4．8×103 杀菌率“ 94．9 98．8 99．5 表3 PVP～I在海水中的杀