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19No3 41
1999Vol
微堆物学杂:占1999年9月第19卷第3期JOURNALOFMICROBIOLOGYSept
·研究简报·。 /1
Q2}
汐
重组碱性成纤维细胞生长因子生物学活性研究+
饶春明 刘 兰 王军志
(中国药品生物■品拴定所生化奄北京100050)
fibroblast MA)盆50和80FT
碱性成纤维细胞生长因子(basic 多功能酶标仪卵E叨t
MAx分析软件为美国分子设备公司产品。
鲫州hfactor,简称bFGF)具有对成纤维细胞、血
管内皮细胞和神经细胞的促生长作用ItJ。国内已1.3 Balide3T3纲胞/^frr生物学活性测定法
有数家公司在研究开发药用bFGF,作为治疗烧 收集对数生长期的mlb/c3T3细胞。悬浮于
伤、烫伤、溃疡等疾病的外用重组牛bR;F已经上1096FBS的1640培养液.调整细胞漱度为8.0×
市。虽然牛bFGF与人bFGF的氨基酸同源性迭104个/lIIl左右,接种于96孔细胞培养板中,每孔
98.7%,但目前上市的重组牛bFGF为融合蛋白。
100vl,于37℃,5%OZb培养过夜;第二天换0.4%
在N一端多了17个氨基酸,有可能导致生物学活
性发生变化。本文应用Balb/c31r3细胞/MTT生过夜;第三天吸去上清,A排加0.496FBS的1640
物学活性稠定法,分析比较了重组牛bF(讯融合培养液作空白对照。从B排起始加入用O.4%FBS
蛋白和重组人bR讯生物学活性。为BR珂质量的1640培养液4倍系列稀释的标准品(50或
标准的制定提供了依据。
起始7个稀释度)备t00#。每个稀释度加2孔。于
1材料与方法 MTT溶液
37℃,5%c02培养72h;加人5耐Inl
1.1材料
璐dS0裂解液,室温下放置30rain后于多功能酶
600
bFGF国际标准品【2t3J(饧de90/712).1
标仪JU MAX分析软件或用
ODIlo。值,用s()FT
lU/支,由英国NIBSC提供;重组牛bFGF融合蛋
作图法【4J计算结果。
白和重组人bFGF,lova/支,由珠海东大生物制药
有限公司提供;1640培养基和小牛血清为GIB-
2结 果
00公司产品;MTT为FIuka公司产品;Ealb/c3T3
细胞为本室保存。
2.1 羽■反应曲线
1.2仪■
。o夯十讥
由
b
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