体外大鼠血液对梭曼解毒作用研究.pdfVIP

林、VX点眼染毒方法，观察了微量神经性毒剂对兔眼瞳孔和虹膜乙酰胆碱酯酶(AChE)活力的影响，并用实 验评价_r目前『l缶床常用的阿托品滴眼液对其缩瞳治疗在化学战中的实用性。结果表明：沙林2．ot,r]lom．眼 点眼，几乎立即可引起瞳孔极度缩小(直径为2～3mm；正常为8—9mm以上)。对光反射消失。缩瞳自然恢 复需48h以上，对光反射也伴随恢复。在沙林点眼约半小时后，极度缩瞳时，活杀动物，取眼虹膜，用微量羟 胺法测定AChE活力，仅为正常值的8％。当缩瞳和对光反射恢复后，虹膜AChE活力便可恢复到正常值的 过了正常值。对光反射失灵。24h后，瞳孔又回缩到小于正常值。以上提示：不能引起全身症状的微量沙 裱、～x直接熏蒸跟，可以引起较长时问的缩膻，其机理之一是虹膜AChE受抑制。实战中，这榉低的沙林浓 度，覆盖面很广，将会对无防护人员大批损伤眼睛，造成减员。常规的阿托品治疗，虽可扩瞳，但用量稍多即 可过大扩瞳，加之对光调解失灵，同样不能执行各种战术动作。另外由于阿托品不能恢复虹膜AChE活力， 所以要反复应用，只有对症治疗作用。阿托品在促进瞳孔真正恢复正常，作用可能不明显。因此，寻找一个 可以迅速通过角膜屏障，使虹膜等中毒AChE恢复，从而达到缩瞳和对光调节都能很快恢复的眼局部用药， 来保障战斗力，急待研制。 体外大鼠血液对梭曼的解毒作用研究 应翔宇 阮金秀 (军事医学科学院药物毒物研究所 100850) 梭曼．作为难防治的神经性毒剂，其解毒机理一直作为防化界的研究热点而倍受关注。梭曼主要经呼 吸道中毒，也可以通过皮肤中毒．但都必须经过血液循环和肺循环才能运送到脑、膈肌等重要靶器官，而在 此运送过程中绝大部分梭曼已经被酶结台解毒或降解成为无毒性的代谢产物，真正能够到达靶器官并与功 能性AChE结合的梭曼量仅有缀小一部分。血液，作为梭曼的首过解毒器官，为了了解它在梭曼首过解毒过 程中(是指梭曼在进入机体之后并在到达靶器官之前机体对其解毒作用的大小)到底有多大的解毒能力，以 血液对梭曼的解毒作用，以期通过对其解毒作用的了解，来进一步探讨如何加强血液对棱曼的首过屏障作 用，从而减少梭曼到达靶器官的量，减轻梭曼对功能性AChE的抑制作用。 1材料与方法 1，1材料 胆碱酯酶，演化乙酰胆碱及对硝基戊酸苯醋由本院药物霉物研究所提供。硫代乙酰胆碱及硫代丁酰胆碱购 自Fluka公司，DTNB购自Sigma公司。 1．2体外游离梭曼检测方法的建立 我们采用电鳐胆碱酯酶抑制法来测定血液中的游离梭曼残留量。具体方法：血浆解毒能力测定，取30m 1mol／L高氯酸终止反应，混匀，一,IcE离心 血浆+151,d不同浓度Soman，37℃反应10，30，60，180s，再加入5td 具有线性关系，根据羟胺显色OD值的变化可以求得梭曼浓度。 1．3血浆中CaE的活性测定 参照Chambers ：8稀释后，取出20tA+780}d0 200td终止液(2％SDS与4％Tris按体积比3：1混合)终止反应．取出200出在414nm处比色。 836 1．4血浆中BuChE活性测定 Hcl终止反应．然后再加入0 30mln，加入30“llmol／L 1．5红细胞中ACHE活性测定 参照董立春AChE的测定方法，并加姒适当修改。具体方法：将处于悬浮状态的大鼠红细胞用50mmol／[． +0．03％DTNB200／xl显色，414nm处比色。 1 6酶结合位点的测定 71000，278000。 转换速率常数：底物水解量／rnin／活性位点?CaE，BuChE，AChE的转换速率常数分别为91920，l 2结果 表I体外大鼠血浆对不同梭曼的解毒情况(11=4) 时河(s 檀星硅留量【ng／ml血浆)