单核细胞增生性李斯特菌prfA基因缺失株的构建和其生物学特性研究.pdfVIP

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2017-08-14 发布于安徽
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单核细胞增生性李斯特菌prfA基因缺失株的构建和其生物学特性研究.pdf

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582蟠》2010年学术年会单核细胞增生性李斯特菌p班基因缺失株的构建及其生物学特性研究白春光殷月兰贾艳艳付红高云飞焦新安” (扬州大学。江苏扬州225009) 引言单核细胞增生性李斯特菌(伽)是人兽共患李斯特菌病的病原菌，其致病性与调控因子PrfA蛋白作用下毒力基因的表达有着密切关系。该菌在黏附、侵袭、胞内增殖及细胞间直接扩散的生活周期中，毒力岛I和毒力岛II的基因受到转录活化因子PrfA的调控。虽然目前对PrfA的调控作用及其它毒力基因的功能有了一定的了解，但仍有许多机制尚不清楚，需要进一步的研究。材料菌株和质粒：大肠杆菌DH5a、DHl013单核细胞增生性李斯特菌血清型为1／2a的野生型菌株LM4、大学Chakraborty教授馈赠。方法变株，对获得的突变株LM4AprfA、F4636AprfA进行生物学特性研究。结果溶血实验结果表明，prfA缺失株的溶血能力丧失，而回复突变株的溶血活性的到完全恢复，由此证明P姒对．Il如基因的表达具有调控作用。磷脂酶实验结果显示，亲本株细菌周围有透明圈，而突变株细菌周围没有出现透明圈，表明突变株失去了磷脂酶活性，证明JPrfA对plcB基因具有调控作显著下降。讨论 Ap,-fa及其回本研究成功地构建了单核细胞增生性李斯特菌的pdA基因缺失株LM4AprfA和F4636 复突变株，并对缺失株的溶血活性、磷脂酶活性、对细胞的侵袭性以及对小鼠的毒力进行了研究，有力本研究为开展PrfA蛋白的调控机理研究奠定了基础。 ·基金项目：教育部。长江学者和创新团队发展计划”创新团队资助：国家支撑计划(2009BADB9801)。江苏高校优势学科建设工程资助项目 E-maih ·‘通讯作者：焦新安，Tel：+86-514Fax：+86-873113741x司／ao@y灿．corn