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长期冻存蟥喇曼影态及力学特性的研究
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山东医科大学附属医院(250012)毕研文侯怀水
应用抗生紊灭菌、液氮冷冻保存健康成 释法冲净组织中的=甲蒸亚砜。解冻后立即
人新鲜尸心带瓣主动脉及肺动脉46个。保存 取动脒壁组织在10“甲醛液中固定。光镜检
时间6--51个月。解冻后的主动貅行组织学查,仞取lmm3组织在25%戍=I鞋中圈定,
观察及对动脒壁行加载一卸载及破坏试验, 作透射电镜观察。力学检弼标本纷为玲冻保
以了解冷冻保存方法和保存时间对人动点{=组 存12—24个月(I组,n一4),第一36十月
织结构及力学特性的影响。 (班组,n岛4,3,个月以上(Ⅱ组慢n犯4j新鲜
材料和方法 主动脒(1组,n一2)律对照。羼有动辣壁均
无菌条件下取脑外伤死亡6小时内健康 环囱留成10×20mm2试件敷个-4℃营养溃
成^尸心主动脉23个,肺动脉23个,尽快髂内放置,在6天内完成涮试。如剩一卸载爰破
剪掉外膜脂肪组织和瓣下心舰组织,放人宿 坏试验;应用德国henckTre静l万照实验
配的曹低浓度广谱抗生裳细胞营养液R^ 机,在室温20℃下,央好试件熟涮定韧长度{。
M11640中4C灭菌48小时。每个带瓣大动 按玑1ram/秒速度等遵加载至棒长25%,幕
脉加30ml细胞营养液,小牛血清和二甲基按同样速度卸载,重复7次,可昂滞后环渐欹
亚砜(8{I:1),特制玲冻袋包装,封口。先蹙减小.然后按同样速度加装至诫件破坏,曲拽
4’C冰箱1小时,稃放置--80℃冰箱12,j、对,连续描记(图1)。
测得冷冻速度为1.4C/分,平均冷冻至一 结果
60℃。后转入渡氮中长期保存。解冻时在 一,各组力学检验见耐袭#
40’C温水中使其迅速解冻,并尽快用倍数稀
附表备绕力学检验参考值(艾±s)
7组别 嚣量 N删.m功mz 黜力f
I 16.30士0.47 3.88±1.Ot 9.n6士o.46』
Ⅱ 18.24士0.93 3.29±1.31 8.蟑7士0.32.
Ⅲ 21.43土1.15 2.86±0.54 7.)们±O.53}
Ⅳ 24.15±1.324 1.64±o.63△ 4;州士0_98Af
△与1组比较P0.05
二、组织学观察:光镜见Ⅱ组动脉璧弹性 纤维致密。排列整齐,缎媳咎清晰·电擎见瓤
·118-
纤维完整,线粒体密集,与I组相似。Ⅲ组光 镜及电镜检查保存2年内的动脉壁几乎可完
镜见部分内皮脱落,弹性纤维尚整齐,电镜见 全保存其结构和力学性能。保存3年内的大
大部分细胞核完整,线粒体轻度水肿,核膜完 动脉虽然组织结构有所改变,但力学测试示
整,与I组相似。Ⅳ组光镜下见部分弹性纤维 仍能保持大致正常的力学特性。保存3年以
断裂,排列松散,电镜下可见细胞棱浓缩,核 上的大动脉组织结构变化明显,力学测试其
染色质凝集,甚至溶解消失。 弹性模量、破坏应力、断裂功值与新鲜动脉组
讨论 织值差异显著(P0.05)。
同种动脉冷冻保存方法及时间对其生物 总之,采用本文方法冷冻保存的人大动
力学性能有影响,进而直接影响其置换后的 脉壁较长时间保存其组织结构、活性和生物
功能和耐久性。长时间冷冻保存对同种动脉 力学性能。我们认为:在临床应用时,由于升
组织结构和生物
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