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21届国际猪兽医协会大会论文集加拿大温哥华2010年7月18.21日
PCV2疫苗接种鉴别EuSA方法的深入研究
Sheela
Rammoorthy(美国)
序言
之前的研究工作表明针对PCV2鉴别ELISA法可以用于检测由疫苗接种产生的特异性抗体。该检测方
Intervet Animal
ScheringPlough Health)疫苗后3—4周猪只的血清抗体。但在某些情况,一些非免疫
猪只在育肥阶段也可以针对野生型抗原(杆状病毒)产生抗体。我们假设这些非特异抗体是由于具有交叉
反应性的昆虫细胞抗原引起的。我们的研究目的是确定在引起免疫猪只免疫反应的成分,是否针对SF9昆
虫细胞交叉反应性抗原可以有助于提高检测的特异性。
材料及方法
实验所使用血清样品来自之前针对研制不同ELISA检测方法的临床和实验室研究,每个血清样品用分
别包被有圆环病毒ORF2蛋白、野生型杆状病毒和SF9昆虫细胞的抗原孔进行检测,每个样品两个重复。在
对于ELIsA,每个板子有包括来自接种和未接种的CDCD猪血清样的合适的对照。杆状病毒抗原孔光密度净
值的计算为由野生型杆状病毒孔减去SF9细胞孔所得。数据结果以组平均光密度值表示。阳性和阴性阻断
率对于野生型抗原和杆状病毒分别计算值为0.300和0.100。
结果
表1显示的是来自三个独立实验做出的野生型圆环病毒、SF9细胞和杆状病毒作为包被抗原检测结果。
采集血样的时间分别为接种前和二次接种后3周。表2显示的是用杆状病毒作为包被抗原检测来自两个临
床研究采集猪只血样中的抗体,这些猪都是直到达上市体重时定期进行采血。A猪群在15周龄和21周龄
检测体内杆状病毒背景抗体,B猪群在14和25周龄检测该抗体。杆状病毒抗体和阳性动物比
例很相似。
表1三组实验组实验结果
野生型0RF2 SF9细胞 昆虫杆状病毒
实验组/时期 光密度值 阳性率 光密度值 光密度值 阳性率
接种组/接种前 O.155 1/18 0.164 O.009 0/18
接种组/接种后 O.616 35/41 O.245 0.37l 38/41
对照组/接种前 O.132 0/17 O.13l O.001 0/17
对照组/接种后 0.224 5/23 0.199 0.026 l/23
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2l届国际猪兽医协会大会论文集加拿大温哥华20lO年7月18.21日
表2两个猪群实验期内昆虫杆状病毒滴度
周龄 A猪群 B猪群
实验组 周 光密度值 阳性率 光密度值 阳性率
接种 3 0.011 O/16 一O.002 O/32
接种 6 0.120 12/16 O.057 3/32
接种 9 O.512 32/32 O.383 31/32
接种 15/14 0.157 9/16 0.235 27/32
接种 21/25 0.200 12/16 0.147 15/30
对照 3 0.001 0/16 O.000 0/6
对照 6 0.016 O/16 O.01l 0/6
对照
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