RNA干扰技术抗HBV与HCV感染的研究动态.pdfVIP

中性粒细胞减少、淋巴细胞减少，90％病人血小板减少，50％病人有贫血、肝功能异常。 诊断与治疗：在HGE流行的夏秋季节，以及在相应的蜱媒存在地区的发热病人，特别是近期内被 蜱叮咬或与蜱有过接触者，应考虑到人粒细胞埃立克体感染。仔细检查外周血涂片，可观察到中性粒 细胞中的桑椹体。用马埃立克体抗原进行IFA检查恢复期血清，有助于回顾性诊断。现在根据HG． E16SrRNA序列设计出两类不同引物，用于扩增、检测和鉴别急性期病人血中的HGE，该项技术是诊断 HGE感染的最可靠方法。 24—48h内开始退热，退热后应继续服用强力霉素3天，以保证彻底清除体内埃立克体。服药后7天 内，白细胞和血小板计数回升，病人症状基本消失。如果对四环素类药物过敏，可选利福平替代。氯 霉素和红霉素对埃立克体的治疗效果不佳。 展望：目前许多研究证明蜱传人埃立克体病是一种新发现的人兽共患疾病，随着病例的增加、新 种的出现，这种传染病的公共卫生学意义日渐突出，已引起欧洲、亚洲和南美洲一些国家的重视。近 年来我国对埃立克体病流行病学研究已取得初步进展。我国蜱种繁多，分布广泛，与美国携带埃立克 体相近的蜱种在我国许多地区都存在，我国在云南从犬和人的血清中查出埃立克体抗体，并从蜱中分 离到埃立克体。因此有必要重视人埃立克体病的研究，进一步探索该病在我国的分布、流行病学特征 及有效的诊断治疗和预防方法。 RNA干扰技术抗HBV和HCV感染的研究 解放军第105医院感染病科郭顺明 美国发现者获得了2006年诺贝尔医学奖。RNA干扰技术和干细胞的基础研究不仅是近几年来医学 领域的两大前沿性课题，也是未来十年内用于临床治疗病毒性肝炎的两大最具有挑战性的研究项目。 由于目前临床用于抗HBV感染的两大药物一a干扰素和核苷类似物不能完全清除肝细胞内的cccD． NA，故其抗病毒效果并不理想。RNA i作为一种新型的抗病毒基因治疗技术，其高效、特异的抗病毒 作用和设计灵活的多靶位效应，使其成为一种前景广阔的基因治疗手段。现就这方面的研究情况作 以介绍。 一、RNA干扰的可能机制 种现象称作RNA干扰(RNA 存在于真菌、植物、无脊椎动物和哺乳动物的各种生物体中。利用双链RNA可以特异性地降解相应 序列的谳悄A，从而特异性阻断相应基因的表达。现在人们意识到这种现象之间存在着密切联系，可 能在生物体内有着共同的生物学意义和相似的作用机制。RNAi作为一种新的基因阻断技术，具有特 异、高效的基因沉默效应，高效地阻抑特定基因的表达，现已广泛用于抗肿瘤，抗病毒的基因治疗研 究。虽然RNAi的确切机制尚未完全清楚，但目前大量的研究表明RNAi主要以转录后基因沉默的方 一77— inter． ferenee 100Kda大小的沉默复合物活性形式，通过硷基互补配对的原则，siRNA识别与自身有同源序列的内源 方式RNAi现象还可传代给下一代。 二、RNA干扰现象的重要特征： 性，能够非常特异性地降解与之序列相应的内源基因的mRNA；(3)RNAi抑制基因表达具有很高的效 率，表型可以达到缺失突变体表型的程度，而且相对很少量的双链RNA分子(数量远远少于内源mR— NA的数量)就能完全抑制相应基因的表达；(4)RN加抑制基因表达的效应可以穿过细胞界限，在不同 细胞间长距离传递和维持。 三、干扰RNA的制备 目前较为常用的制备的方法主要有直接化学合成法、化学合成修饰法、通过表达质粒载体体内转 录、通过病毒载体转录等几种方法，各种制备方法的优缺点见表： 各种制备方法的优缺点 四、RNAi对HCV复制和表达的作用 RNAi对HCV复制和表达有明显的阻断作用，作为RNA病毒的HCV的复制和翻译都局限在宿主 一78— NS4A NS5B、开放读码框起始部位的c区，都是RNAi抗HCV治疗的靶位。很多学者在体外和体内进 胞，两种siRNA与对照组比较均能减少病毒蛋白的表达和HCVRNA的合成达90％以上。 五、RNAi对HBV复制和表达的作用 HBV是DNA病毒，其复制时需要从前基因组RNA逆转录到DNA，这个过程在细胞浆中进行。