奶牛乳房炎无乳链球菌的分离鉴定与特异、快速检测方法.pdfVIP

新疆农业科学 2014，51(7)：1328—1334 XinjiangAgriculturalSciences doi：10．6048／j．issn．1001—4330．2014．07．022 奶牛乳房炎无乳链球菌的分离鉴定 与特异、快速检测方法 王 蒴 ．-，杨学云 ，李建军 ，冉多良，王治才 ， (1．新疆农业大学动物医学学院，鸟鲁木齐 830052；2．新疆畜牧科学院兽医研究所，乌鲁木齐 830000) 摘 要：【目的】了解新疆奶牛乳房炎病例中无乳链球菌的感染状况和生物学特性，建立特异、快速检测方法。 【方法】采集新疆4个不同地区规模化奶牛场乳房炎奶样 ，分别用鉴别培养基和绵羊血琼脂平板进行无乳链 球菌分离培养、形态学观察、生化试验、PCR鉴定、致病性和常用抗生素敏感性试验。 【结果1从检测出的 139 份乳房炎阳性奶样中分离出元乳链球菌24株。所分离菌株培养特性与生化反应符合该菌特性；依据无乳链 球菌16SrRNA基因序列设计引物扩增所得 PCR产物在405bp处出现特异性条带；分离菌株对青霉素、氯霉 素、庆大霉素、红霉素、万古霉素、克林霉素、头孢西丁、环丙沙星均敏感，对四环素、强力霉素、复方新诺明耐 药。 【结论】Granada选择性培养基培养和PCR扩增均可用于乳房炎奶样中无乳链球菌的特异、快速鉴定；新 疆乳房炎奶样中无乳链球菌感染率为 17．27％。 关键词：牛乳房炎；无乳链球菌；PCR；药物敏感性 中图分类号：$851．34 7 文献标识码：A 文章编号：1001—4330【2014)07—1328—07 IsolationandIdentificati0n0fStrept0coccus AagalactiaefromBovineMastitisinXinjiang WANGShuo ，YANGXue—yun，LIJian—jun，RANDuo—liang，WANGZhi—cai (1．CollegeofVeterinaryMedicine，XinjiangAgriculturalUniversity，Urumqi830052，China；2．ResearchIn— stituteofVeterinaryMedciine，XinjiangAcademyofAnimalSciences，Urumqi830000，China) Abstract：【Objective】TounderstandtheinfectionandbiologicalcharacteristicofStreptococcusagalacti— aefrombovinemastitisinXinjiangandtoestablishspecificandrapiddetectivemethod．【Method】Streptococ— c agalactiaewereisolatedrfom mastitissamplescollectedrfom4intensivedairyfarms．andthemorphologi— calobservation，biochemicaltest，PCR identification，pahtogenicitytest，aswellasdrugsensitivitytestwere carriedout．【Result】Twenty—fourS．agalactiaestrainswereisolatedfrom139mastitissamples．Thecultural andbiochemicalcharacteristicsofisolateswerethesamewiht thereferencestrains．A specificrfagmentof405 bpwasamplifiedbyapairofprimersbasedon16srRNA ofS．agalactiae．Thedrugsensitivitytestshowedhtat allisolatesweresensitivetopenicillin，chlomr ycetin，gentamicin，erythroc