低分子肝素脂质体软膏与其吸收机制的研究.pdfVIP

中国资源生物扶术与糖工程学术研讨会论文集2·005 低分子肝素脂质体软膏及其吸收机制的研究 俞淑文，王凤山。，翟光喜，崔慧斐，姬胜利，曹吉超 〔山东大学药学院生化与生物技术药物研究所，山东济南2500121 低分子肝素(Lowmolecularweightheparin,LMWH)是20世纪70年代发展起来的 一种新型抗凝、抗血栓药物，它是豁多糖类化合物。在国内外临床上应用的己有十几个 品种，均为注射剂，临床用药很不方便。我们研制了LMWH脂质体软青，研究了它的 稳定性、形态，药效学、透皮吸收机制及药物代谢动力学。研究内容及取得的结果有以 下几个方面。 I建立了一种测定低分子肝素钠 (LMWH)含量的方法 通过LMWH与抓化十六烷基毗吮 (CPC)反应产生沉淀形成混悬液，采用分光光 度计于波长680nm处比浊，研究LMWH浓度与吸收度的线性关系，并研究本方法测定 LMWH的稳定性、重现性和回收率。结果表明:在一定pH值和离子强度下，LMWH 在12.5-250Ng/ml浓度范围内与CPC反应生成的混悬液在波长680nm处的吸收度与其 浓度呈线性关系，二。.9991;本方法在1-3h内吸收度保持稳定 (RSD=0.142%,n=9), LM 测定浓度为40,100和 160gg/ml时的平均回收率分别为98.63%,99.40和 100.76%,RSD分别为0.34%,0.16%和0.19%a 2筛选建立了LMWH脂质体软膏的配方 配方筛选采用三因素五水平均匀实验设计，按均匀设计表US(50)进行拟水平试验， 以LMWH小鼠体外经皮渗透率及脂质体的包封率为检测指标，考察脂质体配方中磷脂 与胆固醇的摩尔比、磷脂与胆酸钠的摩尔比及脂水相体积比，经统计学处理确定了脂质 体的最佳配方。以筛选的最佳配方制得的LMWH脂质体混悬液平均包封率为42.94%, 经皮渗透率为。.969mg/.h。以体外经皮渗透率为指标，筛选的脂质体软膏中的卡波姆浓 度为1%. 在电镜下观察脂质体的形态，混悬液形态较好，分散均匀，结构清晰。加入卡波姆 后分散明显不如混悬液。但仍能保持完整的形态。 根据药物稳定性试验指导原则，对LMWH脂质体软膏进行了初步稳定性考察。① 光照试验，LMWH脂质体软膏在注射剂澄明度测定仪中放置10天，光源照度4500Lx, 分别于0,5,10天取样，其外观、含量、磷脂的性质均无明显变化;②加速实验，在 温度 (3012)℃、相对湿度 ((60士10)%的条件下，1个月的样品其外观、含量、磷脂 的性质均无明显变化. 3用Chandlers体外血栓形成法观察 脂质体软膏对家兔体外血栓 形成的影响 将家兔脱毛、麻醉.于皮肤上涂抹不同剂量的LMWH脂质体软膏或空白脂质体软 膏，分别于药前，药后2,4,6,8,10h由颈总动脉取血Iml，按Chandlers方法形成 中国资源生物技术与糖工程学术研讨会论文集2005 血栓，称取重量衡量药物作用.与空白对照相比，LMWH脂质体软膏1000,600,360 anti-FXaIU吨能明显抑制家兔体外血栓的形成。在用药4^-(h抑制血栓形成的作用最 强。 4初步探讨LMWH脂质体软膏透皮吸收机制 利用改良的Franz扩散池进行实验，得出LMWH脂质体软膏对皮肤的渗透符合 Ficks扩散，说明药物能够克服角质层的屏障的作用。从家兔皮肤组织切片可观察到， LMWH脂质体软畜用药后lh可在肌层明显观察到LMWH，用药后3hLMWH在肌层 分布最明显，3-5h药物在肌肉中的浓度逐渐减少，而此时根据药效学和药代动力学实 验，药物已进入血液循环，发挥全身性治疗作用。 5研究家兔单次皮肤用LMWH脂质体软膏的药代动力学特征 采用试剂盒法测定血浆中LMWH抗Xa因子活性，以确定LMWH的浓度，用3p87 药代动力学计算程序拟和房室模型并计算药代动力学参数。结果表明:家兔一次皮肤给 药后的血药浓度一时间曲线符合一室模型，主要药代动力学参数t.-为 ((4.2512.23)h, C-为 (0.119士0.028)anti-FXalU/ml,y;2Ka为0.95土1.05h,tr2Ke为12.83士5.0h, iiUC为2.9910.80anti-FXa1U.h/ml，生物利用度可以达到皮下注射剂的46.94%0 关键词 低分子肝素:脂质体:包封率;透皮吸收;药代动力学