仿生纳米生物反应器的构筑与动力学的研究.pdfVIP

仿生纳米生物反应器的构筑及动力学的研究 徐燕，何 静’，马辉，段 雪 (北京化工大学 可控化学反应科学与技术基础教育部重点实验室，北京 100029) 由于介孔材料具有的独特结构特点及性质是其它微孔分子筛材料或无定形材料所不具备 的，由结构特点及性质派生的应用性能也是其它材料所无法比拟的。因此，介孔材料将会在催 化领域和材料领域表现出巨大的应用潜力。利用介孔材料这一特点，本文首先以物理吸附的方 法把猪胰脂肪酶分子引入介孔的孔道内。由于介孔载体的较大孔径和较弱的主客体相互作用， 从而使固定在介孔材料纳米尺寸孔内的酶分子所处微环境接近于游离酶。为了避免孔内固定化 的酶分子在催化反应中的流失，选择了合适的硅烷偶联剂，利用其烷氧基可与SBA-15表面的轻 基进行共缩聚，对载体SBA-15的孔口进行了改性 ’，‘从而将孔口缩小，达到阻止酶分子流失的 目的。最终形成的瓶颈状结构称为仿生纳米生物反应器。在催化反应过程中，这种反应器不仅 会阻止孔道内酶分子的流失，同时还不会对底物和产物造成传质阻力，从而有利于保持固定化 酶的高催化活性和高操作稳定性。 选用Y一(甲基丙烯酞氧基)丙基三甲氧基硅烷偶联剂 (MA)对孔口进行接枝聚合，用XRD. FT-IR和低温N:吸一脱附表征了纳米反应器的结构。XRD谱图显示，SBA-15进行固定化酶 [ME-SBA 以及孔口接枝和聚合得到的纳米反应器IME-SBA-MA和IME-SBA-MA-A，仍保持着良好的长程有 序结构。FT-IR谱图中，1530cm处‘的N-H弯曲振动吸收峰可以判断酶在SBA-15表面实现了固 定化。MA中拨基和乙烯基C-11弯曲振动的1702cm和‘1404cm处的吸收峰证明了偶联剂已接 枝在固定化酶上。由表 1的低温N:吸一脱附数据明显看出，MA对固定化酶进行了有效的孔口缩 口。 本文还通过研究反应器的反应动力学，进一步考察其结构特点和表面性质。以催化橄榄油 水解为探针反应，米氏方程为模型，测定其动力学参数米氏常数K.和最大反应速度V.111，具体 数据如表2所示。IME-SBA-MA在催化反应中的Km值，比IME-SBA的小，说明孔口接枝过程中， 硅烷偶联剂对其孔内的表面有一定的改性，使SBA-15表面的亲水性下降，有利于酶与底物的接 触，从而使得K。值增大。但 IME-SBA-MA的V,.:相较 IME-SBA又有一定的减小，这可能是由于 IME-SBA-MA对底物进行催化反应时，底物的内扩散会对反应速率产生限制作用，从而减缓了 IME-SBA-MA的最大反应初速率。纳米反应器 [ME-SBA-MA-A在催化反应中的Km值，与 IME-SBA-MA 的基本一致，说明孔口接枝后聚合对孔内表面没有明显的影响。但 IME-SBA-NIA-A的Vma、相对于[ME-SBA-MA有所减小，说明孔口聚合使孔口进一步缩小加剧 Tel:010Fax:010E-mail: 了内扩散限制效应。另外，用与MA链长几乎相当，但疏水性更强的n-癸基三甲氧基硅烷偶联 剂 (DE)，对固定化酶孔口进行接枝以及表面改性，由此所构筑的纳米反应器IME-SBA-DE的 K,。值相对于IME-SBA-MA有明显的减小，即一定程度上增强了酶与底物的亲和力，说明对反 应器内表面进行疏水改性对反应器的反应行为有一定的改善;而Vma、相较IME-SBA-MA增大， 可能是由于反应器内表面的疏水性有利于底物的扩散从而缓和了内扩散效应。由此可见，对反 应器内表面进行一定的疏水改性有利于反应器的反应行为，可选择更为合适的硅烷偶联剂对其 进行改性从而得到更好的效果，进一步的研究正在进行中。 表1SBA-151ME-SBA.IME-SBA-MA和IME-SBA-MA-A的孔结构参数 Table1.Porestructureparametersofmesoporousreactor Sample Surfaceareas Porevolume Porediameter (m/g) (cm3/g) (nm) 乙 6 SBA-15 763.64