高压氧对急性脑创伤后海马NOS+mRNA表达影响.pdfVIP

mRNA表达的影响 高压氧对急性脑创伤后海马NOS 周建光1，方以群2，刘长云1，周颖奇1 (1．解放军第四一一医院，上海200081；2．海军医学研究所，上海200433) 急性创伤性颅脑损伤是常见的严重创伤之一，不仅可以引起患者神经功能缺失，而且可 能直接危及病人的生命，国内外非常重视对创伤性颅脑损伤的发病机理及其救治的研究。国 内外研究发现急性创伤性颅脑损伤初期仅为原发性脑损伤，但伤后数小时致数天后可产生继 发性损害，海马EtA区的神经元对急性创伤性颅脑损伤具有高度的敏感性。有研究表明急性 创伤性颅脑损伤后海马nNOS和iNOS表达及活性均增加，是海马继发性损伤的机理之一。高 压氧疗法目前已广泛应用于脑缺血、脑水肿等中枢神经系统疾病的临床治疗，并已收到较好 疗效，特别是对颅脑损伤、脑外伤的治疗，治疗效果非常好，但对其机理的研究甚少，高压 氧治疗对急性创伤性颅脑损伤后海马NOSmRNA表达的影响国内外尚未见研究报道。本研究拟 观察高压氧治疗对急性创伤性颅脑损伤后海马NOSmRNA表达的影响，研究高压氧治疗急性脑 损伤的机理。 1材料与方法 1．1实验动物及分组 实验用Sprague-Dawley大鼠，由上海市计划生育研究所实验动物中心提供，共54只， 健康，雌雄兼用，体重200～300g。购入后自然光照，随意进食，观察和检疫1周正常后进 行实验。按照体重采用随机数字法随机分为9组，每组6只动物：正常对照组(A组)：动物 置于加压舱内，模拟除压力和氧浓度以外的其他实验条件。急性颅脑损伤6h组 (B组)： 动物经颅脑打击后lh，置于加压舱内，模拟除压力和氧浓度以外的其他实验条件，于伤后6 h组(C组)：动物经颅脑打击后1h，置于加压舱内，模拟除 h断头取材。急性颅脑损伤24 压力和氧浓度以外的其他实验条件，于伤后24h断头取材。急性颅脑损伤高压氧治疗6h组 h，置于高压氧舱内，以O．25MPa高压氧下停留60rain，于伤 (D组)：动物经颅脑打击后1 h， h组(E组)：动物经颅脑打击后1和12 后6h断头取材。急性颅脑损伤高压氧治疗24 min，于伤后24h断头取材。急性颅脑损 置于高压氧舱内，以0．25MPa高压氧下各停留60 h，置于高压氧舱内，以0．25MPa常氧 伤常氧高氮治疗6h组(F组)：动物经颅脑打击后l h组(G组)： 高氮环境下停留60min，于伤后6h断头取材。急性颅脑损伤常氧高氮治疗24 min， 动物经颅脑打击后l和12h，置于高压氧舱内，以O．25MPa常氧高氮环境下各停留60 于伤后24h断头取材。 1．2急性颅脑损伤模型的制备 3％戊巴比妥(30mg／kg)大鼠腹腔注射。动物麻醉后俯卧在颅脑损伤打击器上，头部固定 于固定器上，顶部皮肤矢状切开，在左侧顶叶(冠状静脉窦前)皮层处用颅骨钻作一圆形骨 188 窗(外径6lml，圆心在大鼠两耳前缘的连线上)，使硬脑膜保持完整。如钻孔时皮层受损，动 物弃之。将撞杆置于骨窗硬脑膜外，撞杆突出螺旋筒3mill，用100g重的砝码从30cm高处 自由下落打击法使脑发生挫裂伤，待血止后骨蜡封闭骨窗，造成急性颅脑损伤模型。伤后根 据不同的组别进行相应的处理。 1．3动物的高压处理 1．3．1高压氧治疗方法动物置于事先放有钠石灰的动物加压舱(高压氧舱)内，用纯氧(上 海五钢气体公司，纯度99．2％)洗舱lOmin，使舱内氧浓度98％，以0．1MPa／min的速率加 压至0．25MPa，在高压下停留40min，期问问断通纯氧10min以维持氧浓度在95％以上，停 留结束后以10min匀速减压至常压，出舱。舱内温度22～24C。正常组、急性颅脑