RhoA对食管癌Eca-109细胞VEGF表达的调控作用.pdfVIP

· 486 · 匿 且中癯学 志2014年6月第 19卷第6期 ChineseClinicalOncology。Jun．2014。Vo1．19．No．6 RhoA对食管癌Eca一109细胞VEGF表达的调控作用=I： 730050 兰州 兰州军区兰州总医院乳腺科 马 骥，赵庆丽，钟翠萍，刘文超 ，薛 妍 ， 【摘 要】 目的 探讨小G蛋白超家族成员RhoA对食管癌Eca一109细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的调控作用。 方法 食管癌Eca-109细胞转染过表达RhoA质粒 (V14RhoA)或沉默表达RhoA质粒 (shRhoA)后，采用Westernblotting和酶 联免疫吸附试验(ELISA)法分别检测其细胞内外VEGF蛋白表达 ，Westernblotting和Rea1．timePCR分别检测Eca-109细胞转 染 Vl4RhoA和 shRhoA后p53和VEGF表达的情况。结果 Westernblotting和ELISA法检测显示，Eca．109细胞转染Vl4RhoA 后细胞 内、外VEGF表达水平升高，而转染shRhoA后VEGF的表达被显著抑制。Westernblotting和Real—timePCR检测显示， Eca-109细胞转染V14RhoA后p53表达显著降低，而VEGF表达显著升高(P0．05)。结论 食管癌Eca．109细胞中RhoA表 达的变化可以引起细胞内外VEGF水平的变化，并且RhoA可通过抑制p53表达从而增加对VEGF的调控。 【关键词】 RhoA；食管癌；血管内皮生长因子；p53 中图分类号 ：R735．1 文献标识码：A 文章编号：1009-0460(2014)06-0486—40 Theregulatorymechanism ofRhoA onVEGF expression inesophagealsquamouscellcarcinomacellline Eca-109 MAJi，ZHAOQingli，ZHONGCuiping，UUWenchao，XUEYan．DepartmentofBreastSurgery，LanzhouGen— eralHospitalofLanzhouMilitaryCommand，Lanzhou730050，China Correspondingauthor：XUEYan，E-ma il：xueyan@fmmu．edu．ClZ A【bstract】Objective ToexploretheeffectandmechanismofRhoAonvascularendothelialgrowthfactor(VEGF)expression na dregulationinesophagealc~cinomacelllineEca一109．Methods Eca-109cellsweretransfectedbyRhoA up—reug latingplasmid (V14RhoA)ordown—regulatingplasmid(shRhoA)andVEGFexpressionlevelwasexaminedbyWesternblottingandELISAassay． TheeffectofRh0Aonp53expressionwasexaminedbyWesternblottingandreal—timePCR．Results Western blottingnadELISA as— saysshowedthatinEca一109 cellsVEGF proteinexpressionwasincreasedordecreasedwith up-reuglatingordown—regulatingRhoA． Western blottingandreal--timePCRassaysshowedthatincreasedRhoA couldinhibitp53expressionnadthenpromoteVEGFexpres-- sion．Conclusion InEca-109cells，Rh0ACnareuglateVEGFexpression，nadR王l0ApromotesVEGFexpressionthmu~ inhibiting p53expression． 【KeyWords】 Rashomologgenefmaily／memberA(RhoA)；Esoph