山羊精液冷冻保存的初步的研究.pdfVIP

农业、林业及畜牧水产业 4小结与探讨 (1)佳多牌P卜15Ⅱ型频振式杀虫灯对蔬菜害虫尤其是鳞翅目害虫的控害效果显著，对降低防治成 本、有效减少农药残留及其对环境的污染、提高农产品质量起到积极的作用，经济、生态和社会效益显 著。 (2)在示范过程中，我们发现开始的l～2a年效果较很好，诱虫量大，田间幼虫口量降低明显，后 期发现效果有所减弱，受益其中原因有待探讨。 (3)菜农蔬菜面积小，挂灯后农户差异较大，谁也不愿意把灯挂在自己的蔬菜地上，因为一些害虫 在扑灯前就已经产下卵，显现整体防治效果不佳。 山羊精液冷冻保存的初步研究 杨素芳 邹知明 潘红平 石德顺 引 言 山羊的精液冷冻保存技术的研究国外始于20世纪70年代中期，我国始于80年代，但冷冻法尚未成 熟，冻精受胎率低，进展不如牛的快，山羊冻精还未能广泛推广应用，还有很多需要研究的地方。到目前 为止，在大多数的实验中山羊的冻精解冻后的活率都不能稳定地超过50％。近年的研究表明，不同种类 的精子对降温的敏感性差异很大，山羊的精子对低温打击比较敏感。故本研究尝试采用细管法冷冻保存山 羊精液，以甘油作为冷冻保护剂，探讨加入不同浓度的甘油，精液冻结方法的不同，以及解冻温度的不同 对精液冷冻效果的影响，以期获得一种较好的山羊精液冷冻方法。 1材料与方法 1．1 精液来源 公羊来自广西大学牧场，约3．5岁；身体健康及生殖器官没有疾病，繁殖力旺盛。常规假阴道法采 精，精液活率在0．7以上用于冷冻试验。 1．2稀释液的配制 试验设计加入甘油。 1．3精液的稀释与低温平衡 将基础液放在室温下平衡，每管按照l：4—6(精液：稀释液)轻轻摇动，使其混合均匀，镜检活率 1次，达0．7可用。试管分装，封口。该加甘油或蛋黄的此时加入。用纱布20层放到4℃环境下平衡lh 后镜检。 1．4精液冻结 第一作者系广西大学副教授，博士。 ·-——263·-—— 自然科学篇(下卷) min后，将从4℃冰箱内拿出来的 1．4．1液氮熏蒸把液氮倒入泡沫盒，连同细管架一起进行预冷2—3 精液试管摆放在支架上，调好泡膜盒，在距离液氮面3cm处熏蒸9min。迅速用镊子将细管拨于液氮中， 5min后再转到液氮罐里进行保存。． 1．4．2 —80℃冰箱冻结从4℃冰箱内取出细管精液，迅速放入一80℃冰箱9min，然后快速放入液氮内。 1．5精液的解冻取泡膜或是500mL的大烧杯，根据实验设计装入不同温度的温水，从液氮罐中取出精 液冷冻细管，迅速投入到温水中，尽量使细管能快速、同时浸泡入水中，再轻轻搅动使其受热均匀，解冻 30一40s后，取出用干净的纱布把水吸干，备检。 1．6精液品质的检查 用剪刀剪开细管的两端，将精液置预先准备好的载玻片或是盖玻片上，置于光学显微镜下，从低倍到 高倍检查精子的活率，记录结果，计算复苏率。 1．7实验设计 1H7H1实验l不同浓度的甘油对精液冷冻效果的影响。在基础液中加入蛋黄后，在4℃低温平衡后冻 结前加入不同浓度的甘油比例(3％、5％、6％、7％)，试验其对精液冷冻效果的影响。 1．7．2实验2不同冻结方法对精液冷冻效果的影响。把装有精液的细管用纱布包好，在4E平衡后分2 中冻结9min，再投入液氮内。 1．7．3实验3探讨不同的解冻温度对精液解冻效果的影响。把装有精液的细管放到调好预定温度的水 中进行解冻。解冻温度分别为40℃、45℃、50℃、55℃和60℃。 1．8统计分析 所得的实验数据用平均数±标准误差表示，用方差分析测试差异显著性。 2 结 果 2．1 不同浓度的甘油对精液冷冻效果的影响 结果如表l所示，在稀释液中加入3％和5％甘油的处理组之间的精子冻后活率与复苏率，以及加入 6％和7％甘油处理组之间的精子冻后活率与复苏率，差异均不显著(P0．05)；但在稀释液中加入甘油 V8 O．20±0．56，0．31±0．86；复麦K率：0．65±0．80，0．61±0．560．27±0．65，0．41±0．42，P0．05。