猕猴桃分子育种研究进展与展望.pdfVIP

猕猴桃分子育种研究进展及展望 吴延军谢呜蒋棒华赵淼孙崇波张慧琴 (浙江省农业科学院园艺所，浙江杭州310021) 摘要：猕猴桃是多年生果树．常规育种周期长，利川分子生物学技术培育猕猴桃新品种。加 快猕猴桃种质创新，提高育种效率，缩短育种年限，已成为今后猕猴桃育种的发展趋势。因 此，筛选定11i7=与猕猴桃目的基冈紧密连锁的特异分子标记，构建高密度遗传图谱，发掘优异 基冈以及进行分子标记辅勘选抒，分离克隆相关功能基冈及遗传转化，是当前国内外猕猴桃 分子育种和分子生物学研究的热点。本文较详细地综述了国内外猕猴桃分子育种近年来的最 新进展和所取得的研究成果，包括基冈资源研究、分子标记的虑J}J和转基l灭l育种等方面，在 此基础上结合我们的jI：作对现阶段猕猴桃分子育种一l：作提出建议。’ 关键词：猕猴桃，分子育种，遗传图谱，基因转化，基冈克隆 猕猴桃似．Actinidia)原产我国，现有60多个种，商品化种为美味猕猴桃、 中华猕猴桃和软枣猕猴桃等。与节果，香蕉，柑桔等相比猕猴桃果业较小，仅占 世界果实总量的0．25％，但随着人们对健康生活的追求，2005全球已知猕猴桃 右，现猕猴桃因其独特的保健及营养成份，市场对其的需求量H益增大，因此， 商业价值带动了科学研究的巨大发展，尤其是围绕产生新品种的育种及育种基础 研究。 世界重要猕猴桃研究国家多己建立了自己的猕猴桃育种体系，特别是在新西 兰，意大利和中国；这些育种项目主要针对美味及中华猕猴桃，目的是培育果大、 风味优良、果肉颜色新颖、成熟期不同、高产、生长特性良好或雌雄同体的新猕 猴桃品种，为了实现这些育种目标，除了传统的育种方法外，许多不同的现代分 子生物学方法及工具已经被应用到了解猕猴桃果实特性及分子辅助行种中，这是 因为猕猴桃是多年生植物，常规育种周期一般需要15～20年，利用分子生物学技 术培育猕猴桃新品种，不仅可以缩短育利一年限，还可以提高向．利一效率，凶此已成 为今后猕猴桃育种的发展趋势。目前，国内外学者利用DNA分子标记技术在猕 猴桃种质资源的遗传多样性，系谱分析与品种(系)鉴定、性别鉴定、遗传连锁图 谱构建以及目的基因的分离与克隆等方面做了大量的研究工作，取得了可喜的进 展，本文详细综述在猕猴桃基因资源研究、分子标记的应用和转基因育种等方面 的研究成果，在此基础上结合我们的工作对现阶段猕猴桃分子育种工作提出建 议。 1、基因资源的研究 154个、中华猕猴桃145，软枣猕猴桃39，毛花猕猴桃30，葛枣猕猴桃27个， 另外288来自猕猴桃其它种。这些已克隆的基因绝大多数与猕猴桃的果实成熟及 衰老过程密切相关。猕猴桃已被分离和克隆的目的基因有：(I)ACC合成酶(ACS) cDNA；(9)双价耐赫基 蛋白(C棚)基因(cDNA全长)；(8)促进早实性状的Lfy 义基因植株表达载体，为培养耐贮的猕猴桃新品种奠定了基础。同年，任小林等 从美味猕猴桃首次克隆了钙调蛋白eDNA，测定了全序列并进行结构分析，王中 炎等(2000)从中华猕猴桃果实中克隆到多聚半乳糖醛酸酶(PG)基因，并研究了 PG基因表达与果实成熟、乙烯释放的关系。陈昆松等(1 998，2000)从猕猴桃果实 中分别克隆出脂氧合酶基因和D．半乳糖苷酶基因的cDNA片段，采用PCR扩增 方法，从成熟猕猴桃果实中克隆到一个824bp的脂氧合酶基因片段随后又从成熟 中华猕猴桃果实中克隆到一个D一半乳糖苷酶基因的cDNA片段，长度为747bp。 因的表达。这些报道都有助于从分子水平上研究猕猴桃生长与果实发行机理，为 猕猴桃分子育种及种质改良奠定了理论基础。 现新西兰争家园艺与食品研究院己建立了猕猴桃EST数据库，所有ESTs均 是从35个cDNA文库中获得，构建这些文库的猕猴桃材料多为芽或果实组织。 来自毛花猕猴桃，7370来自软枣，其余的来自其它种类，并从此EST库中获得 了400个转录因子的全长基因，这些转录因子多与调节猕猴桃风味、色素代谢及 V-c合成途径有关(Hellens RP,2006)。 4I 2、分子标记的应用