一株鹅细小病毒全基因特征研析.pdfVIP

一株鹩细小病毒全基因特征分析 一株鹅细小病毒全基因特征分析① 万春和②I，朱海侠1”，黄瑜③l，彭春香1， 程龙飞1，施少华1，傅光华1，陈红梅1 (1．福建省农业科学院畜牧兽医研究所，福建福州350013； 2．福建省农林大学动物科学学院福州350002) 一株鹅细小病毒株(GoPV)全基因序列，为我国大陆地区首次报道。结果表明，GoPV株病毒全基因大小为 5106 nt。其基因组主要由 nt，其基因组5’端和3’端均舍有相同的末端倒置重复序列(ITR)，ITR全长为444 VP3)。非结构蛋白(NS)全长为1884nt(537～2420)，其中Ns2全长1356 全长2199nt(2439～4637)，其中VP2全长1764nt(2874～4637)，VP3全长1605 同源性最高，高达98．6％。本研究为进一步研究GPV分类地位以及进化关系提供依据，也为研究GPV强毒 株和疫苗株之间生物学特性、为研究GPV治病机理和开发基因工程疫苗奠定基础。 [关键词]鹅细小病毒；全基因；分子特征 鹅细小病毒(Goose 的广泛重视。 parvovirus，GPV)是感染禽 类的主要自主复制型细小病毒，由我国学者方定一 目前，关于GPV全基因序列仅有少量报道【4“J， 于1956年首先在江苏省扬州地区发现【l‘2J，以后在 国内关于GPV基因序列仅限于其左右两侧两个开 许多国家也分离到该病毒，世界禽类学会为纪念匈 放阅读框(openreadingframe，ORF)，位于左侧的非 牙利学者Derzsy的先进工作而将此病命名为 对于其基因组5’端和3’端均含有相同的末端倒置 Derzsy’s病¨1。鹅细小病毒属于细小病毒科、细小 terminal 病毒属，只有一个血清型。该病主要侵害30d以内重复序列(invertedrepeat，ITR)还未见报道， I 的雏鹅和雏番鸭，引起以急性肠炎及肝、肾、心等实 本研究根据其ITR基因结构在箭头上有一个Sph 质脏器败血性病变，尤其是小肠部位的纤维性、栓塞 限制性内切酶的酶切位点(GCATGC)，设计引物，从 性病变，是目前危害养鹅业健康发展的最严重的传 而获得其ITR序列，经拼接后获得GoPV株全基因序 染病之一，造成了严重的经济损失，引起国内外学者 列，现将研究结果报告如下： ①基金项目：公益性行业(农业)科研专项经费项目(201003012) @126．corn ③Corresponding ·57· 福建省畜牧兽医学会2011年学术年会论文集 DNA 组提取试剂盒、DL2000 1材料和方法 体均购自宝生物工程(大连)有限公司，琼脂糖凝胶 回收小量试剂盒、质粒小量抽提试剂盒购自Omega 1．1毒株 Bio—Tek，其它试剂均为商业公司购买的分析纯。 GPV病毒株为本实验分离并保存。 大肠杆菌(Escherichiacoli)DH50t感受态细胞自制。 1．2试剂