中药的研究应提倡并重视血浆药理学的研究方法.pdfVIP

现代化中药制卉lJ发展与中药药理学研究交流会 中药研究应提倡并重视血浆药理学研究方法1 葛金文1王东兴2，朱惠斌3贺蓉2王字红3贺石林2” (1湖南中医药大学长沙410208：2中南大学湘雅医学院长沙410078) 【摘要】血清的形成与凝血及其相关过程(纤溶与补体系统活化)的蛋白酶级联反应以及血小 板和自细胞活化有关，这些过程直接影响血标本的组成，并可能也影响中药成分；但这些过程可用 抗凝剂而加以避免。因此，血浆的组成较血清能更好地反映生理、病理状况和吸收进入循环血中药 物变化。根据已有报道，药物浓度与反应物质在血浆与血清中可能存在差异，故倡导在中药’仁体内 实验中采用血浆药理学方法。由于不同抗凝剂的作用机制各异，究竟哪一抗凝刺适用于哪类半体内 实验，需要进一步开展研究。我们建议在人多数中药半体内实验中，可以采取含药血浆与含药血清 平行观察，除非事先对该试验的干扰已有充分了解。 [关键词]中药；药理；血清：血浆；半体内实验 尽管药物的疗效与毒副反应的确定主要依赖整体(invivo)试验，但为阐明药物的药理与毒理 作用及其机制，通常还需借助体外(in vitro)与半体I内(exvivo)实验。血清药理学方法属于半体内 实验。关于这一方法，我们义在中国药理学通报发表了质疑血清药理学的专文“’。由于这一问题 关系到中药药理能否被国际生物医学界广泛认可的重大问题，故从促进中药约理学科发展出发，根 据国内外新近进展，结合我们自己的．J：作，提出了发展中药血浆药理学研究方法。 1采用血标本进行半体内实验的合理性 中药成分复杂，若将其粗制品直接加入离体生物反应体系，可能导山假啊l性或假阴性或相反的 结果。为解决这一困难，模拟临床常用服药方式，将中药给动物灌服，而后间隔一定时间，取血制 备血清；以此含有中药成分的血清进行体外实验，即中药血清药理学方法，最早由日本田代真一于 1984年提出屹’。121服或灌服中药后，进入体内的有效成分大致包括六个米源：①中药天然原形成分； ②中药加：【与煎煮过程产物；③胃肠道对中药消化分解产物；④肠内细菌对中药代谢产物：⑤体内 (主要是肝、肺、肾)对中药生物转化产物；⑥中药有效成分介导体内分泌的活性物质。这些成分 与物质都首先出现或存在循环血液中，所以采取血标本作为半体内实验的原材料，大体看是合理的。 然而，血液包括血细胞与血浆两个部分，血清是血液凝同后除去纤维蛋白与血细胞的液体部分，它 有另fJ于血浆。因为凝血及其继发的一系列生物学反应不仅明显改变了血液成分，而且对中药成分与 其派生物质可能产生影响。由此可知，采用血清药理学方法得出的实验结论不一定都是可靠的，其 中可能存在假阳性和假阴性问题。 对于血标本的应用，临床检验通常根据不同项目，分别采用血清、血浆和全血。世界卫生组织 (wHO)2002年关于血标本选择专题报告中指出：“由于历史的缘故，过去通常采用血清；现在许 多实验室倾向于采用血浆。因为凝血引起的级联与相关反应可用抗凝剂加以避免，显然血浆的组成 较血清能更好地反映体内的实际情况”q’。在该报告的推荐项目中，血清6项，血浆57项，抗凝全 血4l项。然而在我国已有的中药药理报道中，以血标本作为半体内实验原材料，几乎都是采用含药 ’国家自然科学基金资助课题，湖南省教育厅科研基金重点资助课题(06A05寸)：气 作者简介：葛金文，博士后，湖南中医药大学教授、博士研究生导师。电话：073 42 现代化中药制剂发展与中药药理学研究交流会 血清，这种“～边倒”的现象是不合理的畸形发展，可能给中药的研究与开发带来严重的不利后果。 2血清与血浆差异的多样性 随着生物科技进步，特别是蛋白组学与肽组学飞速发展，现己明确凝血过程涉及多方面的改变， 主要包括晦s)：①凝血过程中多个丝氨酸蛋自酶原和辅冈子被活化，并释放一些激活肽和碎片；② 血中多种抗凝蛋白因子与凝血过程中丝氨酸蛋白酶结合而减少，同时由此生成的酶一酶抑制物复合 物增加；③接触激活促使纤维蛋白溶解系统活化，除引起纤溶酶—a2纤溶酶抑制物复合物形成外， 还涉及一系列大小不等的纤维蛋白(原)降解产物生成；④接触激活还能触发激肽与补体系统的级 联反应，从而产生一系列激肤和活化的补体成分，其中部分激肽与活化补体成分具有明显的生物活 性；⑤丝氨酸蛋白酶(凝血酶、FXa等)通过与相应受体结合，强烈刺激血小板，致密体与致密管