LC-ESI+MS测定烟草中特有亚硝胺及肩峰与分裂峰现象的研究.pdfVIP

第24卷增刊 分析测试学报 V01．24 2005年11月 of XUEBAO(JournalInstrumental NOV．2005 !里塑茎!璺望!蔓I Analysis) LC—ESi MS测定烟草中特有亚硝胺及 其肩峰和分裂峰现象研究 李琛琛，饶志华，张建勋，陈 政，文大为，刘虎威4 (北京大学化学与分子工程学院，北京100871) 自20世纪70年代以来，人们对烟草和卷烟烟气中的亚硝胺进行了广泛的研究。烟草和卷烟烟 气中已发现的亚硝胺达35种之多，其中以最重要的致癌物质TSNAs倍受关注。为了减少吸烟对健 康的危害，人们对降低烟草和卷烟烟气中TSNAs的含量进行了大量研究；在进行这些研究时，必须 分析大量烟草样品。因此，TSNAs的检测方法对于减少卷烟危害研究具有十分重要的意义。 在分离中发现这些TSNAs出现了文献[1，2]报道肩峰和分裂峰现象。Wu等人口3发现肩峰和分裂的 情况会随着流动相pH值改变而改变。本文针对这6种TSNAs，在pH2．0—8．0的范围内，用LC— ESI MS系统研究了它们在液相色谱分离中的肩峰和分裂峰现象，并根据结果提出了更深入的解释。 1 实验部分 1．1试剂与样品 NNAL)和4一羟基一1一(3-吡啶基)-1一丁酮(HPB)由c购买。用二氯甲烷配置成1mg／mL的储备液，可 以稳定放置3个月¨j。测定标准工作曲线时，用高纯氮气吹干储备液以甲醇稀释配置序列。使用试 剂包括甲醇(色谱纯，Dima)，甲酸铵(99．995％，Aldrich)，原子级纯化水。 1．2色谱条件 1 HPLC分析使用Aglient100高效液相色谱系统，配备DAD检测器及相应色谱工作站，色谱条 件为：色谱柱，VenusilXBP—C18，150×4．6 mmol／L (10 FA，pH=4．0)；B：MeOH；柱温20．0oC；梯度：0—10min，A：80％一65％；10— 15 min，A：65％；15～20min，A：65％一80％。 mmolZL 研究肩峰和分裂峰现象时，流动相A：10 FA的pH分别是2．00，2．25，2．50，3．00， 4．00，5．00，5．50，6．00，6．50，7．00，7．50，8．00；B：MeOH。 60％，B：40％。 2结果与讨论 6种TSNA的定量采用各自的准分子离子 峰[M+H]+的峰面积。因此，在实验中选择 了非常低的质谱碎裂电压，以保证绝大多数准 分子离子的完整，从而获得较好的线性关系与 较佳的检出限。本方法没有采用质谱定量中常 用的内标法，但依然获得了对于质谱定量来说 非常良好的线性关系和精密度。 对于6种TSNA，本方法的检出限可以达 到1．0ng／mL(NNN、NNK、NNAL和如。一 M舡 和 图 种 NNAL)和0．5 m斟 N|呈 ng／mL(NAT和NAB)；线性范围淼㈣地 k的篇一 眦图 000 为0．5—1 ng／mL，线性相关系数均大于 一181～ 第24卷 分析测试学报 增刊 0．998，方法的RSD可控制在5％以下，整个色谱分析仅需23 min，可用于快速准确地测定TSNAs。 对于分离过程中出现的肩峰和分裂峰现象，在pH2．