豚鼠庆大霉素耳中毒后HSP70mRNA的表达.pdfVIP

医学医药 MAPK signalingpathway．C_t31，1997，89：693—702 [6]Hoshi smoothiilll8decell bynuclear南咖一r．B S，GotoM，KoyamaN，髓aI．R鹱；I】】肚i砸dvascularproliferation J Bid them，2000，275：883—889 [7]G咖，sc，da1．Angi0耐inhibitor肿一470inhibitsIlle【lrillectRaiitmuswoundlml吨．J with factor [8】8 Bond e1．Interaction TNP-470 sI，KleinsA，AndersonGL，el ofⅢlgi幡inhibitorbasic蛐印wIhreceptors．J SLlrg．R鹧，2000，92：18—21 [9】王正国，主编．创伤愈合与组织修复．济南：山东科学技术出版社，1998，84—94 豚鼠庆大霉素耳中毒后HSPT0mRNA的表达 倪月秋汤浩符文双 (沈阳医学院生理教研室，中国医科大学听力研究室) 摘要：探讨热休克蛋白(1{SP)70raRNA在庆大霉素(GM)耳中毒中的意义。选用耳廊反射灵敏的健康白 100mg／ks；对照组：每日腹腔注射与GM等量的生理盐水2．5ml／k。两组动物混合饲养，均连续用药lo天。在用 药前和停药后第1天，进行听脑干反应(ABR)测试。各组豚鼠在行第二次ABR检测后，应用原住杂交(XSa) 及图像分析技术观察庆大霉素耳中毒后HSP70mRNA在豚鼠耳蜗中表迭。结果显示：实验组耳蜗ABR阈值明显高 果提示庆大霉素中毒后，动物可能通过增加I-ISP70rnRNA在豚鼠耳蜗的表达保护听力。 shock 热休克蛋白(heat 在于原核、真核细胞中，在细胞中发挥重要作用n以】。HSP70是含量最多的热休克蛋白家族，而且具有多 耳中毒后豚鼠耳蜗内HSF70表达增强，具有保护听力的作用¨J。有文献报道，不同的损伤和细胞耐受损伤 录和翻译是否也具有相同的现象，尚未见报道。本文应用原位杂交(insitu brainstem 技术并结合听脑干反应(auditory 后豚鼠耳蜗HSP70mRNA表达，进一步探讨HSP70mRNA在GM中毒耳蜗中表达的意义。 1．材料和方法 组，每组lO只。实验组：每日腹腔注射GM 续10天。两组动物混合饲养，每日测量体重调整药量。 (2)ABR阈值检测在用药前和停药后第l天，用1％戊巴比妥钠(40 mg／kg)腹腔麻醉，利用Danac 一7型声刺激器(日本少于≯A-,p{y株式会社)发出主频率为2kHz的滤波click声刺激信号，滤波带宽 50Hz一3000I-h，间隔时间90rns，耳机距豚鼠外耳道约O．5cm左右。记录电极置颅顶正中，参考电极及接 107 创新与发展 dB 次，以VC—lO示波器(日本光电株式会社)输出信号，观察时程为20nls，测试强度由95nHL开始， 按10dB递减，接近阈值后按5dB逐档递减，听阈判定以刚出现ABR的Ⅲ波为准。 (3)耳蜗冰冻切片的制备各组豚鼠在行第二次ABR检测后，将豚鼠快速断头，迅速取出听泡。打 开听泡后，充分暴露耳蜗，在解剖显微镜下刺破圆窗膜，将镫骨底脱位暴露卵圆窗，在蜗顶钻-A子L，用 25％蔗糖的PBS(DEPC水配制)中，4℃过夜。次日用OCT包埋，行151zm恒冷冰冻切片。 【4)原位杂交方法检测H