短芒大麦草组织培养体系的建立.pdfVIP

第 37卷 第 1期 中 崮 草 地 学 报 2015 ‘l Vo1．37 No．1 ChineseJournalofGrassland Jan．2015 文章 编号 ：1673—5021(2015)0101U一05 短芒大麦草组织培养体系的建立 李晓玲 ，张金龙 ，房 强 ，张春艳 (1．长春T业大学化学与生命科学学院，吉林 长春 130012；2．吉林省生物研 究所 ，吉林 长春 130012) 摘要 ：以短芒大麦草幼穗为外植体 ，建立 了 比较稳定高效 的组织培养体系 。研究结果表 明，在 含有 3．0～ 4．0mg／I2，D的MS+300mg／ICH+3 蔗糖+0．7 琼脂 (pH5．8)培养基上 ，短芒大麦草幼穗切段愈伤组织诱 导率可达到 8O．0 以上 ；经 Ms+300mg／ICH+0．5mg／I2，4一D+3 蔗糖+0．7 琼脂 (pH5．8)培养基上继代培 养后 ，其胚性愈伤组织存 Ms+300mg／ICH+0．5mg／I2，4一D+0．1mg／I6一BA +3 蔗糖+0．7 琼脂 (pH5．8) 分化培养基 L的分化率为 62．9 ；短芒大麦草组培苗在 1／2MS+ NAA0．1mg／i+蔗糖 1 +琼脂 0．7 (pH5．8) 培养基__【生根后 ，移栽成活率可达到 98．0 以上 。 关键词 ：短芒大麦草 ；幼穗 ；组织培养 中图分类号 ：Q943．1 文献标识码 ：A 随着生物技术和分子生物学研究 的不断发展 ， 在 MS培养基中加入 300mg／ICH、3 蔗糖和 植物体细胞无性系变异 、基因工程和分子标记辅助 0．7 琼脂作为基本培养基 ，再分别添加 1．0mg／I、 育种等植物生物技术在作物品种改 良方面的优势也 2．0rag／I 、3．0rag／I 、4．0rag／L 、5．0mg／L 和 越来越受到牧草育种研究者的青 睐。 目前 ，应用植 6．0mg／I2，4一D配制成各种待筛选愈伤组织诱 导 物体细胞无性系变异或转基因等植物生物技术培育 培养基 (PH5．8)。 抗逆性优质牧草新品种 ，正逐渐成为牧草品质改 良 选择打包尚未抽 出的短芒大麦草幼穗 ，连 同其 和选育研 究领域 中一个新 的研究热点 ]。其 中， 旗叶一块儿取下冷藏备用 。然后在超净工作台上， 建立成熟 、稳定高效 的组织培养体系和遗传转化体 将所取外植体用 70 酒精棉球仔细擦洗 3次，于无 系 ，是牧草生物技术育种研究的前提和基础 。 菌条件下用镊子取出幼穗 。选取其中长度约为1．5 短芒 大麦草 [Hordeumbrevisubulatum (Ttin．) cm左右的幼穗 ，用剪刀将其剪成小段 ，分别接种 于 Link]又名野大麦，从土耳其西部到中国的东北部均 上述待筛选 的愈伤组织诱导培养基上 。于 25±1℃ 有分布，为禾本科大麦属直刺颖组多年生牧草。该 条件下进行 暗培养 ，4周后统计幼穗切段出愈率 。 牧草产量高、品质好 ，具有耐盐碱、耐贫瘠 、耐践踏和 1．2．2 继代培养 抗寒耐旱等优 良性状 ，具有 良好 的生产性能和较高 各继代培养基均 以MS培养基 中加入 300mg／I 的经济价值 ]，常成为建植人工草地 和天然低湿盐 CH、3 蔗糖和 0．79／6琼脂作为基本培养基 ，分别将 碱化草地改 良过程 中比较理想的优 良牧草品种 。同 其 中2，4一D 的含量调整为 0mg／I、0．5mg／I、1．0 时，短芒大麦草也是耐盐碱牧草品质 改 良和选育工 rag／L 、1．5rag／L 、2．0mg／I和 3．0rag／L。 作中常用的牧草材料 [】。本研究 旨在通过对短芒大 将短芒大麦草幼穗切段在诱导培养基上长出的 麦草幼穗切段