小麦组织培养再生相关基因克隆与表达特性分析.pdfVIP

论文摘要集 小麦组织培养再生相关基因克隆及表达特性分析 余茂云1陈朵朵1一冯晨3叶兴国1 (1中国农业科学院作物科学研究所，北京100081； 2武汉大学生命科学学院，武汉430072；3北京城市学院生物技术系，北京100083) 小麦是世界上最广泛种植的主要农作物之一，利用基因工程技术对其进行遗传改良已受到普 遍重视。然而，小麦组织培养再生性能比较差，改进培养基成分、优化培养条件等都不能有效克 服小麦各种外植体组织培养的基因型障碍和提高植株再生率，因而，这在一定程度上限制了小麦 基因工程育种和功能基因组研究的进程。已有研究表明，植物组织培养再生能力受到某些主效基 因或基因簇的协同控制，在泡桐、矮牵牛、芥菜及水稻中先后发现了这类基因的存在，如从再生 能力强的水稻品种中克隆了亚硝酸还原酶基因(胧仍，证明NiR基因可明显提高难再生水稻品种 的再生能力，并可用于水稻遗传转化的筛选标记。本研究根据植物中已发表的再生基因序列，电 行了表达特性分析、相关分子生物学研究及生化功能鉴定。主要研究结果如下： 等几个新基因在氨基酸水平上与已发表的其他物种中的再生基因具有很高的序列相似性，如TsNiR 蛋白功能域预测表明，．所克隆的3个基因编码的氨基酸序列具有已知蛋白的功能结构域，是潜在 的再生相关基因。 预期的生化功能。 3．采用PCR技术分别从二倍体小麦从、SS、肋基因组，四倍体小麦从踮基因组，以及六倍 体小麦AABBDD基因组中扩增了再生基因仡胞尼进行了拷贝数分析，表明已克隆的TaNiR基因有 可能同大多数小麦基因一样存在多拷贝现象。 因表达水平在不周再生能力小麦品种中差异显著。 5．原核诱导分析表明，已克隆的删在蛋白质水平上与预期的蛋白大小一致。 本研究首次从小麦中发掘了再生相关基因，这些基因与其它物种中的同类基因具有极高的序 培养再生性状有潜在相关性。本研究为后续通过转基因技术提高小麦组培再生能力及开发无选择 标记转基因载体系统奠定了基础，同时将有助于解析控制小麦再生性状的分子机理。 作者简介：余茂云，博士研究生，主要从事小麦再生基因克隆研究：叶兴国(通讯作者)，博士、研究员，主要从 事小麦生物技术研究，yexghail．caas．net．cn，电话：010 119