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2010年微纳尺度分离和分析技术学术会议暨第六届全国微全分析学术会议 基于微流控芯片的水力门控进样用于单细胞分析研究 陈璞，孙建，冯晓均，刘笔锋* 华中科技大学生命科学与技术学院，武汉市珞瑜路 1037号，430074 Tel: 027 Email: bfliu@hust.edu.cn 摘要: 系统生物学作为后基因组时代的一门新兴学科，强调在细胞水平、个体水平上研究生 物体，这给当前的实验分析技术带来了极大的挑战[1, 2] 。在诸多新兴技术中，微全分析技术 因其具有与大多数细胞和微生物相似的特征尺寸，并且易于实现微型化、功能集成化、多路 并行处理等优点，因此在单细胞、单生物体分析中扮演了重要的角色[3-5] 。在本工作中，我 们提出了一种基于微流控芯片的灵活的流体控制策略—水力门控进样，该方法能够在一个简 单的十字型微流控芯片中实现高时空分辨率（时间分辨率：5 ms；空间分辨率：4 µm ）的样 品传输控制。我们首先建立了水力门控进样的理论模型，然后通过数值仿真和流动可视化实 验对该模型进行了验证。基于此方法，我们针对不同的实验应用提出了三种不同的样品进样 模式。将该技术和荧光检测相整合，我们实现了基于连续流的细胞分选和基于二相流的选择 性液滴包裹细胞，并得到了较高的细胞纯度和回收率。将该技术和脉冲压力驱动的细胞定位 技术相结合，我们实现了高时空精度的细胞刺激，并将之应用于单细胞分析和细胞间通讯的 研究中。我们期望该技术能够为基于微流控芯片的细胞和生物体处理与分析提供一种简单易 行、灵活可靠的选择，并且有益于系统生物学的研究。 关键词：微流控芯片；水力门控进样；单细胞分析；细胞分选；细胞刺激 图 1：水力门控进样用于细胞处理和分析原理图 （A ）细胞分选 （B ）选择性细胞包裹 （C ）化学药物刺 激用于单细胞分析 （D ）化学药物刺激用于细胞间通讯分析 参考文献 [1] H. Kitano, Science 2002, 295, 1662-1664. [2] K. Cottingham, Anal. Chem. 2005, 77, 197a-200a. [3] L. M. Borland, S. Kottegoda, K. S. Phillips and N. L. Allbritton, Annu. Rev. Anal. Chem. 2008, 1, 191-227. [4] D. Cohen, J. A. Dickerson, C. D. Whitmore, E. H. Turner, M. M. Palcic, O. Hindsgaul and N. J. Dovichi, Annu. Rev. Anal. Chem. 2008, 1, 165-190. [5] C. E. Sims and N. L. Allbritton, Lab Chip 2007, 7, 423-440. 2010年微纳尺度分离和分析技术学术会议暨第六届全国微全分析学术会议 Hydrodynamic gating for single cell analysis on a microfluidic chip Pu Chen, Jian Sun, Xiaojun Feng, Bi-Feng Liu* Britton Chance Center for Biomedical Photonics at Wuhan National Laboratory for Optoelectronics - Hubei Bioinformatics Molecular Imaging Key Laboratory, Department of Systems Biology, College of Life Science and Technology, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430074, China (bfliu@mail.hust.edu.cn) Abstract: As an emerging field in the