α玉米赤霉醇对小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化过程中OPG和RANKL蛋白表达的影响.pdfVIP

中国骨质疏松杂志 2015年2月第21卷第 2期 ChinJOsteoporos，February2015，Vol21．No．2 PublishedonlineWWW．wanfangdate．com．cn doi：10．3969／j．issn．1006-7108．2015．02．008 163 · 论 著 · 一 玉米赤霉醇对小 鼠骨髓问充质干细胞向成骨细胞分 化过程 中OPG和 RANKL蛋 白表达的影响 方晔 宗少晖 赵劲民 曾高峰 邹斌 彭金珍 1．广西医科大学第一附属医院脊柱骨病外科 ，广西 南宁 530021 2．广西医科大学第一附属医院骨科 ，广西 南宁 530021 3．广西医科大学公共卫．生学院，广西 南宁 530021 4．广西医科大学研究生学 院，广西 南宁 530021 中图分类号：R651．2 文献标识码：A 文章编号：1006．7108(2015)02—0163—06 摘要 ：目的 探讨 OL一玉米赤霉醇(仅一zearalanol，O,／一ZAL)对小 鼠骨髓 问充质干细胞 (Bonemarrow—derivedmesenchymalstemcells， BMSCs)向成骨细胞增殖、分化的影响。方法 采用全骨髓培养差速贴壁法体外分离培养小鼠骨髓问充质干细胞，取第 3代细 胞分为空 白对照组 、雌二醇阳性对照组 、低浓度 d—ZAL组、中浓度 d—ZAL组，高浓度 d—ZAL组。镜下每天观察细胞形态变化 ， 碱性磷酸酶染色鉴定成骨细胞纯度 ，MTT实验测定细胞增殖活性绘制细胞生长 曲线，采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定碱性 磷酸酶 (alkalinephosphatase，ALP)、骨形态发生蛋 白2(Bonemorphogeneticprotein-2，BMP2)，运用蛋 白免疫 印迹法 (Western blotting，WB)检测护钙素(Osteoprotegerin，OPG)和 NF—KB受体活化配体 (Receptoractiatorofnuclearfactor—KBligand，RANKL) 的蛋 白水平表达变化 。结果 不 同浓度的 “一玉米赤霉醇可显著的促进小 鼠骨髓间充质干细胞 向成骨细胞增殖、分化 ，增加细 胞活性 (P0．05)，明显提高小 鼠骨髓间充质干细胞 向成骨细胞分化后 ALP和 BMP一2的表达 (P0．05)，并且显著的上调 了 成骨细胞 内OPG／RANKL的表达率(P0．05)。结论 不 同浓度的d一玉米赤霉醇可 以促进骨髓 间充质干细胞 向成骨细胞增 殖 、分化 ，并且通过上调 OPG／RANKL的表达率抑制成骨细胞细胞 向破骨细胞分化 ，有望成为临床骨折疏松症治疗 的激素替 代药物。 关键词 ： 一玉米赤霉醇 ；骨髓 间充质干细胞 ；成骨细胞 ；骨形态发生蛋 白2；护钙素 The effect of a．zearalanol on the expression Of 0PG and RANKL during the osteoblast differentiati0n by bonemarrow derived mesenchymalstem cellsin m ice FANG Ye ，ZONG Shaohui ，ZHAO Jingmin ，ZENG Gaofeng ，ZOU Bin ，PENG Jinzhen 1．DepartmentofSpineOrthopedics，theFirstAffiliatedHospitalofGuangxiM edicalUniversity，Nanning530021，China 2．DepratmentofOrthopedics，theFirstAffiliatedHospitalofGuangxiMedicalUniversity，Nanning530021，China 3．CollegeofPublicHygieneofGuangxiM edicalUniversity，Nanning 530021，China 4．GraduateSchoolofGuangxiM edicalUniversity，Nanning530021，China Correspondingauthor：ZONG Shaohui，Email：