益气清热方对Ⅰ型幽门螺杆菌感染裸鼠胃粘膜P53、Bcl-2表达影响.pdfVIP

中医药对幽门螺杆菌抑制作用的研究进展，．c 刘冠岐1 朱方石2 2南京中医药大学附属中西医结合医院 I南京中医药大学江苏南京(210028) 摘要本文就中医药对幽门螺杆菌(Hp)抑制作用的研究现状，从中药有效成分及提取物、 中药方剂、中医辨病复方、中医辨证分型论治、成药制剂等方面进行了综述，认为中医药在临床和 实验研究中具有不同的抑制Hp的作用，有些甚则与西医的疗效相当；同时评价了中医药在抑制 llp研究中的不足，并对中医药抑制Hp研究的未来提出了展望。 中医药治疗幽门螺杆菌感染性胃病的研究进展 王振1寇琼2△ l内蒙古医学院，内蒙古呼和浩特市(010059)2内蒙古自治区人民医院中医科 摘要通过对近年来相关文献分析、总结，本文对幽门螺杆菌感染性胃病的病因病机、辨证分 型、舌像及治疗进行阐述，以指导临床运用。 益气清热方对I型幽门螺杆菌感染裸鼠 胃粘膜P53、Bcl．2表达的影响 陆为民·吴静沈洪杨学文朱萱萱 李克涓 朱长乐单兆伟 江苏省中医院消化科、检验科、药理研究室、病理科(210029) 炎症反应更为明显，细胞凋亡与增殖失衡，更能加重胃上皮细胞损伤，促进抑癌基因的失活及癌基 因的激活，与萎缩性胃炎、胃癌的关系更为密切。既往的临床与动物实验研究表明，益气清热方对 Hp虽有一定的抑杀作用，但远较西药的清除率低，而改善临床症状、胃镜征象及胃粘膜组织病理 学表现作用显著，其作用机制值得进一步探讨。本研究观察了益气清热方对I型Hp感染裸鼠胃粘 膜P53、Bcl．2表达的影响，拟从细胞凋亡角度探讨其治疗Hp感染的机理。 l材料与方法 1．1动物 SPF级裸鼠，雄性，体重为20：￡-29，购自中国科学院上海实验动物中心，合格证号：中科(沪)动 管第99004号。实验鼠饲料与垫料均为SPF级，购自江苏省协同医药生物工程责任有限公司，许可证 号为：苏A饲生字2002(009)．小鼠自出生后即饲养于无菌通风橱，饲料、垫料及饮水均经灭菌处理， ·116· 1．2药物 折算为临床用药剂量的lO倍)． ． 1．3 Hp菌株 标准的I型H[p菌株ATCC49503，为本院检验科杨学文主任保存的国际标准株。 1．4 Hp培养 将Hp菌株接种于含7％马血清的琼脂培养板上，置于37℃微需氧环境中(5％02、lO％C02、 85％N2)培养，48h收集细菌，最后用生理盐水制成loscfu／ml的细菌悬液，备用。 1．5动物分组与造模 参考郭刚的方法，建立I型Hp裸鼠感染的模型。100只裸鼠随机分为5组(正常组、模型组、 黄芪组、黄芩组、益气清热方组)，每组20只，正常组及模型组每日给生理盐水灌胃，其余各组灌 的Hp菌液灌胃，每鼠1．3ml，灌胃前禁食禁水24小时，两周后禁食，次日处死，无菌取出胃．实 验过程中，黄芪组及益气清热方组裸鼠各死亡3只． 1．6免疫病理学检查及图像分析 将胃置于lo％中性福尔马林液中，固定24小时后，按要求取材，脱水，石蜡包埋，41an切两片， 司产品，所有抗体均为即用型抗体。切片经常规脱蜡、水化后，用3％的过氧化氢去除内源性酶，0．4％ 胃蛋白酶消化．DAB显色，苏木素衬染，用PBS液代替第一抗体作阴性对照，用已知的阳性标本切片 作阳性对照。P53蛋白棕色颗粒位于胞核内，Bcl．2蛋白以腺上皮细胞核膜、胞浆出现棕色颗粒为阳性。 密封片号情况下(单盲)，在光学显微镜下由同一入观察阳性细胞染色范围及程度。每张切片随机抽 (江苏康克新柏公司)对染色强度进行定量分析。测定阳性细胞的面密度(目标面时统计场面积)、积分 光密度(106)，求出每组标本的平均面密度与平均积分光密度，两者越高，说明透光度高，染色强度高． 1．7统计学方法采用SPSS13．0统计软件处理，计量数据均以均数士标准差(i士s)表示， 组问比较用单因素方差分析。 2结果 2．I益气清热方对Hp感染裸鼠胃粘膜P53表达的影响 组能显著降低P53的表达，与模型组比较有统计学差异(P0．01)． 表I黄芪、黄芩、益气清热方对Hp感染裸鼠胃粘膜P53表达的影响(亨±J)