下调Cullin1基因对脑胶质瘤细胞U251周期及相关蛋白的影响.pdfVIP

· 94· 徐州医学院学报 ACTA ACADEMIAE MEDICINAE XUZHOU 2015，35(2) 下调 Cullinl基 因对脑胶质瘤细胞 U251周期及相关蛋 白的影响 孙胜广 ，周波涛 ，范月超 (1．徐州医学院研究生学院2011级，江苏 徐州 221004；2．徐州医学院附属医院神经外科 ，江苏 徐州 221002) 摘要：目的 探讨 CuUinl(Cul1)基因对脑胶质瘤细胞 U251细胞周期的影响。方法 运用 ControlsiRNA、 CullsiRNA分别转染脑胶质瘤细胞 U251，Westernblot检测 Cull蛋白表达，流式细胞仪检测脑胶质瘤细胞 U251 细胞周期的变化，WesternBlot检测Cull基因干涉后对脑胶质瘤细胞 U251细胞周期蛋白及细胞周期蛋白依赖性 激酶抑制剂的影响。结果 与ControlsiRNA组相比，CullsiRNA组脑胶质瘤细胞U251Cull蛋白表达量降低99． 1％；Cull基因干涉后脑胶质瘤细胞U251细胞G 期的细胞 比例上升比较明显；Cull基因干涉后脑胶质瘤细胞 U251中的CyclinD1及 CyclinE的蛋白表达量明显减少 ，而p21和p27的蛋白表达量明显增加。结论 CullsiR— NA靶向干扰了Cull的表达，通过下调 CyclinD1、CyclinE蛋白的表达，同时上调p21和 p27蛋白的表达，使脑胶 质瘤细胞U251停滞在G，期。 关键词 ：Cull基因；胶质瘤 ；细胞周期 中图分类号：R739．41；Q784 文献标志码 ：A 文章编号：1000—2065(2015)02—0094—03 Effectsofdown——regulatedCullinlgeneon thecellcycle ofbrain gliomaU251cells SUN Shengguang ，ZHOU Botao ，FAN Yuechao (1．Grade2011，GraduateSchool，XuzhouMedicalCollege，Xuzhou，Jiangsu221004，China； 2．DepartmentofNeurosurgery，theAffiliatedHospitalofXuzhouMedicalCollege，Xuzbou，Jiangsu221002) Abstract：Objective ToinvestigatetheeffectsofCullinl(Cul1)onthecellcycleofgliomaU251cells．Methods TheexpressionofCullin gliomaU251cellswassilencedthroughtransfection ofCullsiRNA．Thenthepresenceof CullproteinwasdetectedusingW estern blotting．ChangesinthecellcycleofU251cellsweremeasuredbyflow cytome— try．Meanwhile，theexpressionofcellcycleproteinsandcyclin—dependentkinaseinhibitorswereexaminedafterCull silencing．Results Comparedwiththecontro1．CullsiRNAcouldknockdowntheexpressionofCullby99．1％ inglio— maU251cellsandremarkablyincreasethepercentofcellsinG1phrase．AfterCullsilencing，theexpressionofcyclin D1andEproteinsweredrasticallyreduced，whilethelevelsofp21andp27proteinweresignificantlyenhanced．Conclu-