人血浆与脑脊液中美罗培南浓度的HPLC测定方法研究.pdfVIP

参评青年优秀论文 203 人血浆及脑脊液中美罗培南浓度的HPLC测定方法研究 张宇一， 郁继诚， 林东防， 徐晓刚， 张 菁， 吴菊芳 复旦大学附属华山医院抗生素研究所，上海 200040 摘要：目的 建立人血浆及脑脊液样品中美罗培南的定量测定方法。方法 0D孓80TM 采用高效液相色谱法，TSK—gel mm×4．6 5 C18柱(150 mm，5“m)，血浆样品测定流动相为1mmol／L 相为10mmol／L乙酸胺(PH3．86)一乙腈(90：10)，紫外检测波长均为308nm。结果血浆样品中美罗培南保留时间为3．148 分钟，在O．5～100 美罗培南保留时间为3．810min，在o．25～50 个月内回收率稳定。血浆及脑脊液样品检测时均使用PABA(对氨基苯甲酸)为内标物。结论本研究建立的美罗培南检测 方法灵敏高、特异性强，适用于临床药代动力学的研究。 关键词：美罗培南； 血浆； 脑脊液； HPLC 美罗培南属于碳青霉烯类抗生素，具有广谱抗菌活性。其对革兰阴性球菌、阴性杆菌、厌氧菌包括产 ESBI。s和AmpC酶的耐药菌均具有良好的抗菌作用。本品组织分布广，包括中枢神经系统均能达到有效的 药物浓度。临床上主要用于治疗耐药革兰阴性菌所致的呼吸道、尿路、腹腔、以及中枢神经系统等感染。为 了解美罗培南血及脑脊液浓度，我们旨在建立该药在血浆和脑脊液中浓度测定的高效液相方法(HPI，C)，以 满足药物动力学研究和临床监测的需要。 材料与方法 一、仪器 AE240分析 PE20 天平；Mikr020离心机；Mettler_TolebopH计；Organomation氮吹仪。 二、药品与试剂 物制品检定所，100017—200509)。乙腈(色谱纯，HoneywellBurdickJacksonSolvent)；乙酸胺(色谱纯，Te— (KH2P04)≥99．5％，汕头金砂化工厂]。 三、色谱条件 0D孓80TM mm×4．6 (一)血浆样品固定相为TSK—gel C。。柱(150 mm，5肛m)；流动相为15mmol／L nm；柱温35℃；流速1．0 KH2P04(pH3．2)一乙腈(87：13)；紫外检测波长308 mL／min，进样量20弘L。 0D孓80TM mm×4．6 (二)脑脊液样品 固定相为TSK—gel C18柱(150 mm，5m)；流动相为10 mL／min，进样量20 mmol／L乙酸胺(PH3．86)一乙腈(90：10)；紫外检测波长308nm；柱温35℃；流速0．8 肛L。 四、空白血浆及脑脊液来源与处理 空白血浆购自华山医院血库；空白脑脊液取自未使用美罗培南的脑外科患者，均置一20℃冰箱保存。 五、样品的处理 204 参评青年优秀论文 (一)血浆样品取血浆样品O．2mL，加入内标浓度为100 mL及乙腈0．2 mg／L的PABA储备液0．01 min(10000 mL；涡旋混合后离心10 r／min)，取上清液o．2 mL在37℃水浴中用氮气吹干；残留物用0．