洋葱伯克氏菌基因型的鉴定及其在苜蓿模型上的毒力分析.pdfVIP

微生物学报ActaMicrobiologicaSinica 48(11)：1445-1450；4November2008 ISSN0001—6209；CNI1-1995／Q http：／／joumals．im．ac．cn 洋葱伯克氏菌基因型的鉴定及其在苜蓿模型上的毒力分析 张立新 ，宋江华，谢关林 (安徽农业大学植物保护学院，合肥 230036) (浙江大学生物技术研究所，杭州 310029)(安徽农业大学园艺学院，合肥 230036) 摘要：【目的】证实来 自我国农业和医院环境中部分洋葱伯克氏菌的基因型并通过苜蓿植物模型探测 不同基因型对人体的可能毒力。【方法】采用洋葱伯克氏菌基因型的PCR特异性扩增技术对来源于 根围、土壤和医院中的57株洋葱伯克氏菌进行了基因型的鉴定，并利用苜蓿植物模型对这些基因型 菌株进行了毒力探测。【结果】获得 4种不同的基因型，包括基因型 I、ⅢA、ⅢB、V和Ⅸ。来源 于医院的基因型 I和ⅢA菌株以及根围的基因型ⅢB菌株均对苜蓿幼苗有较强的毒力，其对苜蓿幼 苗的平均发病率分别达到69％、68％和55％，与农田环境中基因型V和Ⅸ对苜蓿幼苗的发病率相比， 表现出显著的差异性。【结论 】农 田环境中洋葱伯克菌的基因型在苜蓿模型上的毒力差异大，根围的 基因型ⅢB菌株对苜蓿幼苗具有强毒力，其毒力程度接近于医院致病基因型ⅢA菌。 关键词：洋葱伯克氏菌；基因型；苜蓿；毒力 中图分类号 ：Q933 文献标识码：A 文章编号：0001．6209(2008)11-1445—06 洋葱伯克氏菌广泛分布于自然环境中，包括土 筛选毒力因子花费昂贵，而且周期长，因而延缓了致 壤、水、植物及根围等，在农业领域中具有生物防治、 病因子的发现及其致病机理的研究进展。 生物降解和促进植物生长等多种功能…。同时它也存 当前植物侵染模型被认为是一种有效的研究动 在于医院环境中，是临床上重要的人体条件致病菌之 物致病细菌的分子致病机制的手段。采用植物模型和 一 。 洋葱伯克氏菌主要感染肺囊性纤维化患者，导致 动物致病细菌的突变体可以较容易的筛选病菌的毒 “洋葱伯克氏菌综合症”，在国内外已有不少死亡病 力因子 】。近年来研究表明苜蓿可以作为评估 Bcc 例[1’2]0该菌在我国临床上的分离率也呈逐年增加趋 毒力因子侵染的模型n1。针对国内外 自然环境中不同 势，已成为临床上重要的条件致病细菌 3【】。因此， 来源 Bcc基因型的毒力研究相对较少的状况，本研究 洋葱伯克氏菌作为生防菌剂在田问的应用 已引起国 拟采用苜蓿植物模型对中国农 田环境和医院中的Bcc 内外高度关注。 菌株进行毒力探测，从而为评估不同Bcc基因型的安 近年来的研究表明该菌不是一个种，而是一组表 全性提供重要依据。 型相近但基因型不同的菌群，即洋葱伯克氏菌群 (Burkholderiacepaciacomplex，简称 Bcco到目前为 1 材料和方法 止，已发现Bcc包括 10个不同的基因型(I X)[6~Ill。 1．1 材料 研究者试图通过发现和挖掘致病基因来区分 Bcc的 1．1．1 菌株：标准菌株 LMG1222由比利时根特大学 致病株和非致病株…，但由于采用动物模型(小白鼠) 国家菌种收藏中心Swings教授提供。57株Bcc菌株 基金项目：国家自然科学基金(3087l655；安徽省教育厅 自然科学基金(KJ2o08B2l2) 通讯作者。Tel：+86571E-mail：glxie@zju．edu．cn 作者简介：张立新(1978一)，男，河北定兴人，讲师，博士，研究方向为植物细菌学。E-mail：zhanglixinjoy