木瓜蛋白酶的研究进展.docVIP

木瓜蛋白酶的研究进展；摘要：本文主要介绍了木瓜蛋白酶的组成及结构，阐述；关键词：木瓜蛋白酶；提取新技术；食品加工；应用；Abstract:Thecompositiona；Keywords:papain;newextra；木瓜蛋白酶又称木瓜酶，是一类巯基蛋白酶；1.木瓜蛋白酶的组成及结构；现已知经木瓜乳汁干燥而得的木瓜蛋白酶至少含有四种；2．木瓜蛋白酶的提取新 木瓜蛋白酶的研究进展 摘要：本文主要介绍了木瓜蛋白酶的组成及结构，阐述了木瓜蛋白酶提取的新技术，进一步介绍了木瓜蛋白酶在食品加工中的应用，并对其在医药、化工、未来食品工业中的应用进行了展望。 关键词：木瓜蛋白酶；提取新技术；食品加工；应用 Abstract: The composition and structure of papain was described, and its new extraction technology, applications of papain in food processing was further described, and its applications in pharmaceutical, chemical industry and the future prospects of food processing have been prospected in this article. Key words: papain; new extraction; food processing; application 木瓜蛋白酶又称木瓜酶，是一类巯基蛋白酶。广泛地存在于番木瓜的根、茎、叶和果实内。其中在未成熟的乳汁中含量最丰富。它具有酶活高、热稳定性好、天然卫生安全等特点，目前已被广泛应用于各个行业。在食品行业中，用于肉类嫩化、啤酒澄清、饲料添加剂和鱼类加工；在工业上，用于明胶制造．蚕茧脱胶、皮革脱毛等；在医疗卫生方面，用于驱肠虫剂，用于治疗消化不良、各种炎症和水肿等。 1.木瓜蛋白酶的组成及结构 现已知经木瓜乳汁干燥而得的木瓜蛋白酶至少含有四种主要酶类：木瓜蛋白酶（papain）、木瓜凝乳蛋白酶（chymopapain）、木瓜蛋白酶Ω（papaya proteinaseΩ）、木瓜凝乳蛋白酶M（chymopapain M）[1]，其中木瓜凝乳蛋白酶的含量最多，占可溶性蛋白的45%。木瓜乳汁中四种已知半胱氢酸蛋白酶的一级结构具有高度同源性。除chymopapain含有8个半胱氨酸外，其余三种酶都只含有7个半胱氨酸。25位的巯基是活性位点，不参与二硫键的形成(chyroopapain的117位巯基也不参与二硫键的形成)，其余巯基以相同的方式形成三个二硫键，具有同样的保守性。人们在不同清晰度下得到了四种酶的x—射线结构。四种酶的肽链折叠方式相似，形成两个大小相同、构型不同的区域。一个是由α-螺旋构成的L一区，另一个是由大量反向平行的片层构成的R一区。活性位点氨基酸残基cys25，ksnl79和Hisl59就位于这些区域的表面，其中Cys25位于L一区起始α-螺旋上。木瓜蛋白酶家族的Cys25，Gly23，Gly65形成的S。亚部位是 一个大口袋，对底物专一性影响较小；S亚部位由于酶不同其氨基酸组成不同，几何形状亦不同，对酶的性质影响较大。[2~3] 2．木瓜蛋白酶的提取新技术 2.1 超声波法提取木瓜蛋白酶 超声波提取法作为一种新型的提取技术已经比较广泛地应用于天然植物有效成分的提取。超声波产生的空化效应[4]，一方面赋予溶剂对细胞壁更大的渗透力，并强化细胞内外的质量传输，另一方面破坏细胞壁，使细胞内含物更易释放，从而强化了提取过程[5]。超声波形成的微射流效应也是提高提取率的一个重要原因。肖贵平[6]曾用超声波法提取木瓜蛋白酶。选择新鲜的番木瓜，清洗后切块破碎，称取果肉，打浆；果浆在一定条件下进行超声波处理，离心、除杂、过滤后，上清液进行超滤浓缩，收集酶液样品。结果表明：超声功率300W，超声时间200s，果浆质量分数30%，这时酶活力是未经超声波处理的1.71倍。 采用超声波提取工艺得到的粗酶液的含量较低，含有较多杂质，经膜分离初步纯化浓缩后，还需作进一步纯化处理，这有待于进一步深入研究，以提高酶的活性和纯度。 2.2 亲和色谱法提取木瓜蛋白酶 亲和膜色谱技术是一种20世纪80年代末发展起来的生物大分子分离纯化的新技术，把膜分离与亲和分离结合起来，使之兼具膜分离与亲和分离的特点。聂华丽等[7]以尼龙膜为基质，键合壳聚糖进行表面改性处理，以降低尼龙膜的非特异性吸附，并偶联染料配体Cibacron Blue F3GA，得到一种新型的亲和膜色谱材料，并用其对木瓜蛋白酶进行分离。结果表明，该亲和膜具有良好的色谱性能，对木瓜蛋白酶有较高的