野生黄绿蜜环菌的成分分析及其生物活性初探.pdfVIP

福建武夷山 第九届全国药用真菌学术会议暨药用真菌专业组织成立三十周年庆 2009年lO月 野生黄绿蜜环菌的成分分析及其生物活性初探 周昌艳1，何庆邦2，唐庆九1，刘艳芳1，门殿英3，郭倩1· (1．上海市农业科学院食用菌研究所。上海201106； 2．西南大学园林园艺学院，重庆400715； 3．上海市农业科学院质量与标准研究所，上海201106) 摘要：采用常规方法对野生黄绿蜜环菌的营养成分进行了分析，同时，采用Alamar蓝试剂法对野生黄 绿蜜环菌水提取物的细胞活性进行了分析。结采显示：野生黄绿蜜环菌的氨基酸总量达21．47％，租蛋白 质42．60％。粗脂肪2．50％。总糖42．65％，粗纤维8．6％。微量元素：钙800mg／kg，磷9200mg／k，钾 47500 mg／kg，铁345mg／kg，锌98．4 mg／kg。其水提取物具有刺激淋巴细胞增殖与抑制 mg／kg，硒2．14 肿瘤细胞增殖的活性(invitro)．野生黄绿蜜环菌是一种营养价值高，并具有保健价值的食崩菌。值得进 一步研究开发。 关键词：黄绿蜜环菌；成分分析；生物活性 黄绿蜜环菌[Armillarialeuteo．virens(Alb．ErSchwein．：F0】属于担子菌门、担子菌纲、伞 菌目、口蘑科、蜜环菌属。其主要分布于我国的青海、西藏，海拔2500-—-4500米的高原 草甸地区，人们对其进行的人工驯化栽培研究刚刚起步，尚不能进行人工栽培。当地人称之 为黄蘑菇、双环菌，子实体肥厚，味道鲜美，有特殊的菌菇香气，并具药效，是一种珍稀的 野生食药用菌，被藏民誉为“草原一宝”【I】。本研究在分析野生黄绿蜜环菌的营养成分、多 糖等基础上，对其免疫与抗肿瘤的细胞活性进行了研究，为更好地开发利用这一极具价值的 高原生物资源提供依据。 1材料与方法 1．1材料 I．1．1 样品野生黄绿蜜环菌，采自青海省天峻县，去泥洗净，经晾晒成干菇后用小型粉碎 机粉碎为过60目筛的粉末，供各个实验测定。分析结果均以干品的含量计算。 1．1．2实验动物Balb／cdx鼠，8周龄，体重20．25克，购自国家实验动物中心上海分中心。 1．1．3实验瘤株SW620人肠腺癌细胞株，L1210鼠白血病细胞株，K562人白血病细胞 株，均为德国柏林自由大学生物化学与分子生物学研究所提供。 1．1．4试剂 1640培养基 植物血凝素(PHA)为Sigma公司产品，热灭活小牛血清，RPMI Blue Merck公司产品，Aiamar蓝试剂(AlamarAssay)为比利时Biosourca公司产品，5．氟尿 嘧啶(5．Fu)为美国西格玛公司产品，其它试剂均为国产分析纯。 细胞培养前，在RPMll640培养基中加10％热灭活小牛血清、100IU／mL青霉素、100 Il 1640完全培养基。 g／mL链霉素和0．449／L谷氨酰胺，此培养基称为RPMI 1．1．5样品处理样品经95℃以上的热水提取2d,时后，过滤，滤液浓缩后，用透析袋对水 透析5次，浓缩，冷冻干燥，以磷酸缓冲液(PBS)配制为10mg／ml的样品液，再分别以其稀释 至所需浓度。对测试其对小鼠淋巴细胞增殖的促进作用。 样品用95％乙醇超声提取，过滤，滤液蒸干后，样品分别配成不同浓度，检测对人肠癌 细胞SW620、人白血病细胞K562、鼠白血病细胞L1210的细胞增殖的抑制作用。 1．2主要仪器与设备 HITACHIl 80__80型原子吸收分光光度计，WatersUPLC高效液相色谱工作 ACQUTTy 站，美国Waters公司，BECKMAN6300型氨基酸自动分析仪。BC．R2001型旋转蒸发仪，上 海贝凯生物化工设备有限公司；冷冻干燥机，ThermoSavant公司；台式冷冻离心机， HT多功能酶标仪，基凶公司。 SORVALL公司；Synergy 1．3检测方法 1