美洲大蠊若虫cDNA表达文库的构建与初步鉴定.pdfVIP

生生熊生塑堂塑鱼堡芏盘查!些!至!旦蔓!!查垄卫l鱼垫!丛!!翌b丛1坚坚!!!!凹11螋!!!堂；l，塾趔 变应原实验研究 美洲大蠊若虫cDNA表达文库 的构建和初步鉴定 刘志刚 黄炯烈 朱振宇 周珍文 刘玉琳 龚十妹 【摘要】目的构建美洲大赡若虫eDNA表达文库。方法应用定向克磕技术将相应eDNA片 段插^kExCell／NotIlEe．oRI／CIP载体的NotI和EeoRI双酵切位点间，并采用PER方法对瓶^片段 x 大小进行分析。培果已成功构建一十含1．291旷个重组子的eDNA表达文库，重组辜为100％，插 入片段大小平均约112kb。翁论所建文库容量及插^片段大小适合对美洲大■若虫特异性重组变 应原的进一步研究。 ， 【关t嗣J美洲大蠊者虫；fDNA表达文P鼠鉴定：重组变应原 uymrh o_灯咖n删Ⅳt鹏q曲删怔^z_廿锄0feDNA幅p妇Ⅱh了dh呐■岫^__—c-m M,Mical Unitz,rs毋， 删岛柳‘f．BUANG如耐诂，ZHUZhmyu，dd．册圳岫口}矿Po,．n,itd．oty，zb咖n 510089 GHⅢ‘g吐ou covatructaeDNA Ameriemm expression 【舢—Ⅲ】0M啪To librmg-of nymph．Mere· Periplanem odin weae veet缸 clonedinto；咀．aCpal／NottEcc,R I I／CIP eDNA如唱menhof蹦p18豫hAmericm“yo平h pl、Bge d自roctional eDNA eDNA b d叩iⅡE．Thele岵山of b印瑚抛惴detected竹PER．R鼬Theexpressimxliterary comaructetlconlatm1 29x ofr∞omblnaneeWits andthe 100％t I∞劬 l旷recombinams，恤eftlcilmcy average of I．12kb．C供．dh吐蝴The fori珊·errecomK删aller-- i珊赶州eDNA libm竹is fragments伸吐日ut qmdifi,Ml 蛐． 【Key-o岫I AIn哪icm ell- P．蚋pl姐eh nymph；eDNA旺pl捌画匝l班m工y；Chlrlmledmtion；Reeombimmt lergm 应用基因重组的方法制备重组变应原，是分子 大蠊L2一L3期若虫数十只，用无菌生理盐水充分洗 生物学技术在变态反应学中的重大应用，在变态反 涤后，滤纸吸干水分，经分析天平称重后分装，冻存 应性疾病的临床诊治方面，无论从改进现有的免疫 于液氨中备用。 诊断用粗抗原、提高检铡的敏感性与特异性，还是从 2．试剂来豫：RNA提取试剂盒、mRNA纯化试剂 发展用于变