proBDNF在脊髓损伤后对少突胶质细胞前体细胞增殖和迁移的影响.pdfVIP

度的BMP．2、BMP．4、BMP一7培养，每12h对迁移情况进行记录，主要测定其 组神经干细胞细胞迁移距离较对照组远、且相同浓度下BMP．4BMP一7 BMP．2。而在较高的深度BMP(15．25 ng／m1)作用下胚胎NSCs迁移的距离降低。 结论：低浓度的BMP．2、BMP一4和BMP．7在不同程度上促进神经干细胞迁移。 【关键词】骨形态发生蛋白、神经干细胞、迁移 科， 710004 pr0BDNF在脊髓损伤后对少突胶质细胞前体细 胞增殖及迁移的影响 褚天慈刘粲冯世庆 天津医科大学总医院，天津市和平区鞍山道154号，300052 邮箱：chenyouzmd@yahoo．com．cn 通讯作者：冯世庆 【目的】由少突胶质细胞前体细胞(OPCs)参与的脊髓损伤(SCI)后轴突的再 髓鞘化过程是一个内源性的修复过程，其对挽救残留轴突，促进后期功能恢复具 有重要的作用。 神经营养因子(NTs)作为一类重要的调控因子，对损伤后神经的再生修复 具有重要的调节作用。但近年来的研究发现，神经营养因子前体(proNTs)对神 经的损伤后修复具有广泛的抑制作用。本课题组前期的研究发现：脑源性神经营 养因子前体(pro．Brain．DerivedNeuro仃ophicFactor，proBDNF)不仅直接抑制轴 突的再生和延伸，而且抑制损伤后巨噬细胞介导的炎性浸润反应，特别是影响损 伤局部有害物质的清除，提示pr0BDNF对于损伤后修复的影响不仅仅限于神经 元本身。 基于上述原因，本实验研究拟观察脑源性神经生长因子前体(pr0BDNF)对 OPCs增殖分裂及迁移的影响。并进一步探讨其与p75NTR信号转导通路的关系。 【方法】本研究分为体内实验和体外实验两部分。 408／466 体内实验应用proBDNF抗体治疗SD大鼠T9脊髓损伤模型，观察损伤后 物学活性的影响；初步探讨proBDNF作用与p75信号通路的关系。 体外实验应用小鼠少突胶质细胞前体细胞系0LN．93作为研究对象，测定不 同浓度梯度proBDNF对于0LN．93细胞分裂增殖活性的影响；应用细胞划痕实 验观察proBDNF对OLN．93细胞迁移活性的影响；应用免疫荧光染色和 影响，讨论proBDNF作用与p75NTR信号途径的关系。 色表明proBDNF治疗组的大鼠脊髓内损伤区域处于分裂阶段的OPCs细胞数量 活性显著提高，功能恢复也明显优于对照组。 体外实验亦发现proBDNF对OLN．93细胞的分裂增殖具有明显的抑制作用， 且这一作用具有浓度依赖性，其随着proBDNF浓度的升高而增强。proBDNF抗 体可以特异性拮抗proBDNF的作用，且不具有明显的浓度依赖。 抗体则对细胞的迁移具有促进作用。 用。 【结论】内源性proBDNF对0PCs的分裂增殖和迁移具有明显的抑制作用，可 以干扰由OPcs主导的再髓鞘化修复过程。这一抑制作用主要通过 4∞，466