加味痛泻药方对肠易激综合征大鼠治疗作用的实验的研究.pdfVIP

加味痛泻药方对肠易激综合征大鼠治疗作用的实验研究 湖北中医学院附属医院 (430061) 李天望童昌珍胡运莲 前言 IBS是一胃肠功能紊乱性疾病，是指一组包括持续或间歇发作的腹痛、腹胀、排便习惯和大便性状异 常而又缺乏生物化学和形态学可资解释的症候群。本病十分常见。欧美问卷调查的研究发现，在自然人群 后的IBS人群患病率分别为7．01％和0．82％．现代医学作了大量研究，发现其发病机制错综复杂，很难用 一种理论或学说予以合理解释。由于本病发瘸涉及精神、饮食、个体素质多个方面，现代药物临床作用局 限，不能满足临床要求。中医药由于从整体观着眼治疗，疗效肯定，副作用少，有着广阔的前景。痛泻药 方是湖北中医附院名老中医院吴守善教授经验方．具有疏肝理气，健脾和胃，驱风渗湿之功。经长期临床 观察验证，对治疗IBS疗效显著，尤其是对腹泻型。本研究从多角度探讨其治疗IBS的作用机制及优势。 实验研究 一、材料和方法 l、实验材料 锄)的动物笼中，幼鼠由母鼠喂奶，约25天后颗粒饲料饲养。自由饮水，同时随机分笼饲养．每笼10只。 每日清洗笼具一次，开窗通风二次，每次30分钟，每周消毒笼具及房间一次． 饲料：颗粒饲料，由同济医科大学实验动物中心提供。 药品及试剂：加味痛泻要方煎剂由白术、白芍、柴胡、陈皮、防风、厚朴、车前子等组成，为吴守善 教授经验方，所用药物均经生药学鉴定，由中医附院药剂科特制成口服煎剂，低剂量每毫升含生药1．59． 用法：碾碎，混悬于蒸馏水，每毫升含1．79mg． ．CGRP、SP放免试剂盒由北京华英生物技术研 究所提供：酸性正丁醇、正庚烷、OPT溶液、半胱氨酸由华中科技大学同济医学院病理教研室提供 主要实验仪器与设备 Gc一91l—y一放射免疫记数器中国科技大学实业总公司 台式高速低温离心机 Gentrifuge5415德国 荧光分光光度仪 R卜—-5301型 日本 低温冰箱 Forma952型 美国 分析天平 TG328型 湘仪天平仪器厂 BL410生物代谢机能系统 湖北中医学院电生理实验室提供 球囊导管 自制 2、实验方法 2．1IBS模型制作及分组 2．1．1造模：采用结肠慢性刺激法造成肠道过敏的IBS模型。清洁级s D大鼠从新生后第8天开始，分成 l帆)经肛门插入2cm，注入0．5％的醋酸O．3m1．对照组同法给予等量0．9％的生理盐水，作为对照．从 第2l天后的三周内，不进行任何实验操作． 上述大鼠在停止刺激4周后，分别评估肠道敏感 性。①评估大鼠的腹部回缩反射：将石蜡油润滑后的导管经肛门插入，球囊末端距离肛门lcm。用胶布把 内，大鼠不能转身，lOmin后逐渐注水(匀速)扩张肠道，分别观察引起腹部抬起和背部拱起的容量阈值． 进行行为评估．②记录腹壁肌电活动评估肠道敏感性： 用苯巴比妥(30mg／kg)麻醉，将一铜制双极电极 缝合到腹股沟韧带上方，距中线1．5cm的一侧腹外斜肌上，电极的游离端经皮下隧道至于颈后，固定．术 后4天内腹腔注射青霉素(20万单位)抗感染。手术后5d开始肌电记录。将石蜡油润滑后的前述导管经 肛门插入直肠内，球囊末端距离肛门Icm，电极导线的两端连接BL410生物代谢机能系统。让大鼠休息5min 后，分别在不同容量下进行直肠扩张，每次膨胀持续5min，记录5min内腹壁收缩次数。每次扩张结束时， llV以上认为是一次有意 将水回抽，检测球囊有无漏水。记录肌电活动，肌电活动增高超过基线水平100 义的腹壁收缩活动。检测完后．模型组和对照组各随机抽出8只大鼠断头处死，取距肛门8锄内的结、直 肠段，作常规病理切片HE染色，在光镜下观察．统计分析：结果用均数±标准差表示，组间变量比较用t 检验。 2．1．2模型评价 行为测试：在第8周，从模型组