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简述代谢工程的研究现状及进展 宋文军 张克旭 魏春 (天津轻工业学院食品工程系天津300222) 摘要 本文准确论述了代谢工程的发展历程和定义，全面阐述了代谢工程的研究现状．并 且对代谢工程的研究进展进行了展望，同时较全面的列举出代谢工程研究过程中可能出现的 问题。 关键词代谢工程；研究；应用发展 现代生物技术手段包括基因工程、细胞工程、发酵工程和蛋白质工程等技术。 其中发酵工程是生物技术的重要组成部分，是生物技术转化成产品的重要环节； 九十年代提出的代谢工程发展迅速．可将之看成是继传统的蛋白多肽单基因表达 (第一代基因工程)、基因定向突变(第二代基因工程)之后的第三代基因工程。 一、代谢工程的定义 fem_ 代谢工程(Metabolic control engineering)是在代谢控制发酵(Metabolic lentation)的理论基础上发展起来的理论体系。 生物途径工程(Metabolicpathway JE于 代谢途径(包括生物体非固有的代谢途径)，提高特定代谢物的产量。Bailey 的酶活、转运和调控功能，提高细胞活力。 目前代谢工程较系统的定义如下：代谢工程，又称途径工程(Pathwayengi— 析生物学相关的遗传学手段进行有精确目标的遗传操作，改变酶的功能输送体系 的功能，甚至产能体系的功能，以改变细胞某些方面的代谢活性的整套操作工作 (包括代谢分析、代谢设计、遗传操作、目的代谢活动的实现等)，简而言之，代谢工 程是生物化学反应代谢网络的有目的的修饰。由此来看，代谢工程意义重大，其主 要解决的问题是改变某些途径中碳架物质流量或者改变碳架物质在不同途径中 的流量分布，从而达到修饰初级代谢，将碳架物质流导入目的产物的载流途径以 ·】20· 获得产物的最大转化率。 二、代谢工程(含代谢网络)的研究现状 本世纪五十年代后期开始了以谷氨酸发酵法生产为起点的代谢控制发酵；七 ‘ 代谢工程得以全面研究。 1．关于代谢工程的一些基本概念 1．1代谢网络相关内容 ’ 1．1．1代谢网络 分解代谢途径、合成代谢途径和膜输送体系的有序组合构成代谢网络，广义 的代谢网络包括物质代谢网络和能量代谢网络。代谢网络的组成取决于微生物的 遗传性能和微生物细胞所存在的环境(也就是取决于微生物细胞的生理状况)。代 谢网络主要由其核心部分和两个在运行时间上有交叉的部分组成。它们分别是： (1)中心代谢途径： (2)指中心代谢途径，并以中心代谢途径中间化合物为接口的途径(收敛途 径)； (3)以中心代谢途径的中间化合物为起点，从中心代谢途径发散的途径(发散 途径)。 1．1．2网络刚性 所有生物都经过初级代谢途径给细胞成分的合成途径提供生长和维持所必 须的前体和能量。作为在大自然特有的条件下长期进化的结果，微生物细胞具有 在代谢网络某些分支处对抗碳架物流量改变的控制机制，这种碳架物质流量分布 不会因某终端产物对其合成途径的反馈调节(反馈抑制、反馈阻遏)的解除而发生 重大的调整。我们将生物体固有的这种对流量改变的抵抗能力称为代谢刚性或网 络刚性。 1．1．3网络节点 在代谢网络中，载流途径上代谢中间物分支点称为网络节点。我们可以把产 物形成时流量分配发生明显改变的节点作为主要节点。 根据节点处代谢流量的调节机制和特性可将节点分为如下三类： (1)若流入每一分支的流量容易改变以满足需求，这样的节点称为挠性节点 似，每个分支的反应速度也相近，每一分支流量受相应的终端产物反馈抑制控制。． (2)若在一个节点的流量分配由它的一个分支的动力学占优势，则称该节点