桔皮中抗氧化物质测定.pdfVIP

持久性有机污染物论坛2007暨第二届持久性有机污染物全国学术研讨会论文集 桔皮中抗氧化物质的测定 李蜀眉卜， 塔娜1，田维平2 (1内蒙古农业大学理学院，呼和浩特，0100018；2内蒙古农业大学生物工程学院，呼和浩特， 010018；·联系人，E·Mail：sus9999@sina．corn) 1．引言 食品抗氧化剂的研究近年来在国外发展很快。抗氧化剂不但可添加到油脂及富脂制品中，甚至 在化妆品和宠物食物的保鲜中也有大量的应用。还发现一些天然抗氧化剂具有抗癌、抗衰老和防治 脑血管病的作用，用它们可制成保健食品或保健药品。为了解决合成抗氧化剂的安全问题，各国都 在为发展新型抗氧化剂进行大量的研究工作。我国新型抗氧化剂的研究也在积极开展。 据报道许多以植物为原料的抗氧化剂的抗氧化效果很好，对人体安全可靠，但真正应用的还不 多，除了需尚待研究外，资源也是原因之一。如欧美开发的迷迭香和以茶叶为原料的抗氧化剂，但 我国无迷迭香资源，茶叶也较昂贵。因此，从充分利用资源，找出安全可靠的天然抗氧化剂的目的 出发，用废弃物桔皮提取氧化物质并对其抗氧化性能进行了研究。 黄酮类化合物在植物界分布很广泛，许多黄酮类化合物及其衍生物都有很好的抗氧化能力，除 具有抗氧化作用外，还有抗癌和防止血管疾病，抗过敏等多种生物活性。黄酮类化合物的抗氧化作 用主要表现在清除自由基、清除超氧化物等方面。本文是用溶剂提取桔皮中黄酮类化合物，通过 DPPH法对其清除活性自由基的研究。探讨不同溶剂提取的黄酮类化合物含量与其生物活性的关 系。 通过研究黄酮类化合物清除自由基的效果，为黄酮类化合物在食品、保健、化妆品等方面的应用 提供一定的理论依据。 2．材料与方法 2．1仪器设备及材料 UV一120__02分光光度计 桔皮：新鲜桔皮洗净，干燥，切碎备用； 2．2化学试剂 三氯甲烷，冰乙酸，甲醇，乙醇，醋酸乙酯，甲酸，氢氧化钠，硅胶，芦丁，正丁醇，亚硝酸 钠，硝酸铝，三氯化铁，DPPH等均为AR级。 2．3试验方法 2．3．1桔皮抗氧化物质的提取 取切碎桔皮适量，加入有机溶剂浸提24h，过滤，收集滤液；再向滤渣中加入一定量的有机溶 剂，同法浸提。将两次滤液合并，减压浓缩，并回收溶剂。 2．3．2总黄酮的定量测定 准确称取桔皮提取物适量，用30％乙醇溶解，定容至一定体积。取该溶液适量放入50ml容量 瓶中，用30％乙醇补至25ml，依次加入显色试剂：1．4ml 10ml 1．4mlAl(N03)3溶液(1：10)，摇匀，放置6mira 量进行定量。 持久性有机污染物论坛2007暨第二届持久性有机污染物全国学术研讨会论文集 2．3．3黄酮类化合物的薄层分析(TLC) 制备G254硅胶薄板。用不同展开剂分别对不同溶剂提取的黄酮类化合物进行分离，并以芦丁做 对照、1％FeCl3为显色剂做定性检测。 2．3．4 DPPH法测定桔皮提取物对自由基的清除率 配制桔皮提取物的待测溶液：用30％乙醇溶解桔皮提取物适量，并定容至一定体积。 2x 吸取待测溶液5．00ml，加入5．00ml 处的吸光度值Ai。再测5．00ml DPPH的清除率用抑制率K来表示。 K=[1-(Ai-Aj)／A。】x100％ 式中Ai-5ml待测溶液+5mlDPPH溶液的吸光度： Ai_．5ml待测溶液+5ml溶剂的吸光度； A广5mlDPPH溶液+5ml溶剂的吸光度。 3．结果与讨论 3．1桔皮提取物中黄酮类化合物总量的测定 3．1．1 芦丁标准曲线 别放入6支50ml容量瓶中，显色定容后，在波长390nm处测其吸光度，测定结果见表1。 表1 芦丁溶液标准曲线(波长390nm) 提取溶剂 50％甲醇 75％甲醇 75％乙醇 95％乙醇 总黄酮含量(％) 9．8 10．32 9．66 8．27