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高效毛细管电泳法同时测定尿液清蛋白和肌酐.pdf
338 JournalofClinical 5
临床检验杂志2007年第25卷第5期ChineseLaboratory
文章编号:1001-764X(2007105-03384)3中国分类号:R446.1 文献标识码:A ·论著·
高效毛细管电泳法同时测定尿液清蛋白和肌酐
赵绍林,吴惠毅,吉艳,杨新玲,扬晋(连云港市第一人民医院检验科,江苏连6港222002)
摘要:目的建立同时测定尿液清蛋白和肌酐的高效毛细管电泳法。方法对缓冲系统、pH值、缓冲液的离子强度、检测波
mmoL/L、
长、表面活性剂、电压及电流和进样方法等进行研究.建立同时测定清蛋白和肌酐的毛细管电泳法。结果选择20
93硼砂一NaOH(含6mmol/l,SDS)缓冲液作为毛细管区带电泳运行液。利用外标法定量,检测波长214nm,同时测定肌酐
pH
rain。肌酐和清蛋白
和清蛋白。非涂层毛细管有效长度47.5till,内径75斗m;电流79斗A,压力进样1psi、4s,电泳时间为12
32~8 95~1000
的线性范围分别为4 840tzmol/L和I mg/L,肌酐和清蛋白最低检出限分别为0977ixtnol/L和0.285mg/L。
本法的日内和日间变异系数均小于48%。肌酐和清蛋白的平均回收率分别为99.6%和1024%。结论建立的方法线性范
围宽,测定简单快速,可用于临床检测。
关键词:毛细管电浓;肌酐;清蛋白;糖尿病肾痛
为12rain。2次运行之问用0.1
尿微量清蛋白/肌酐(Alb/Cr)比值测定对糖尿
病肾病诊断具有重要的价值,已广泛应用于临床。 min,再用电泳缓冲液冲洗5rain平衡毛细管。
毛细管电泳结合了-色谱和电泳技术的优点,目前已 2结果
用于临床实验诊断领域”。,我们通过实验建立用毛 21检测波长的选择 配制一定浓度的肌酐和人
细管电泳技术同时测定尿液微量清蛋白和肌酐的方 清蛋白水溶液在岛津uv.2450紫外可见分光光度
1 nnl处、清蛋
法,经临床应用,结果满意,现报道如下。 计上作光谱扫描(图1),肌酐在234
1材料和方法 白在190IIPll处有吸收峰。由于许多物质在波长接
近190ilm处存在吸收峰,为避免干扰,我们选择
1.1仪器P/ACE“MDQ高效毛细管电泳分析仪
214
nm作为检测波长。
(美国BeckmanCoulter公司),二极管阵列(DAD)
检测器,Gold分析软件。UV.2450紫外可见分光光
度计(日本岛津公司)。pHS一3C型酸度计(上海雷
emx75
磁仪器厂)。非涂层毛细管(47.5 nm)购自
河北锐滓色谱器件公司。
1.2试剂20mmol/L、pH9.3硼砂一NaOH电泳缓
冲液(含6mmol/LSDS),经0.45
Ixm滤膜抽滤后备
用。SDS为电泳级,其他试剂均为分析纯。人血清
清蛋白购自Sigma公司,批号A8763。肌酐标准品
8840
lxmol/l。(1mg/m1),批购自上海
生物制品研究所。
图1肌酐及清蛋白吸收光谱
1.3标本来源120例健康成人为我院体检巾心
体榆健康者,无心、脑
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