漱口水对白色念珠菌生物膜作用的体外的研究.pdf

中国化学会第14届反应性高分子学术讨论会 漱口水对白色念珠菌生物膜作用的体外研究 熊开容1，2符若文1’吴丁财1钟朗丁2 l中山大学化学与化学工程学院材料科学研究所，广州510275 2广东工业大学，广州510006 生物膜是附着于无活力或活组织表面的、由其自身产生的细胞外基质(extracellular matrix，ECM)包裹的有结构的菌细胞群体，是细菌在自然界存在的主要形式。生物膜中的 菌株表现出与浮游状态截然不同的表现型，比如较强耐药性，生长速度的减慢等，因此生物 膜中的细菌对抗生素具有较强的抵抗力，如导尿管生物膜中绿脓杆菌对妥布霉素的抵抗力为 液体培养荫的500--1000倍。生物膜中的牙龈卟啉菌对甲硝唑的M1C值是浮游状态的16倍。 变形链球菌生物膜对NaF的MIC值为液体培养基细菌的32倍，对茶多酚的MIC值为16 倍l¨。 现有的抗菌剂抗菌性能检测标准是以游离于液体培养基中的细菌与真菌的单细胞状态 作为研究对象，这虽然在最大程度上简化了外界环境的影响，然而越来越多的研究证实在自 然状态下，微生物很少以这种纯培养基中的游离形式存在，生物膜才是细菌最常见的生态环 境和￡扛存方式。试验证明，细荫生物膜的耐药性通常远高于游离菌。 细菌生物膜引起的耐药性的研究目前主要集中于生物膜的基础研究和临床研究，目前所 报道的生物膜的抗菌性研究多源于医学领域，而抗菌剂的生物膜评价方法的研究报道较少。 Suzanne B．I．Luppens等人建立了金葡菌生物膜的抗菌性能测试方法，他们在玻璃、不 锈钢和聚苯乙烯等材料上构建生物膜，并对两种抗菌剂苯扎氯铵和次氯酸钠进行抗菌性能测 试，结果发现，生物膜中的金葡菌对前述两种抗菌剂的抵抗力是菌悬液中游离茵的50--600 倍121。 与围绕生物膜而展开的如火如荼的基础和临床研究而言，生物膜的抗菌剂抗菌性能测试 方法的研究还远远不够，一方面不能将生物膜的前沿研究应用于抗菌剂的检测，另一方面， 现有的生物膜的抗菌性能测试方法也不足以对抗菌剂抗菌性能检测标准做有效补充。因此抗 菌剂抗菌性能体外生物膜试验方法已急需建立，以便为抗菌剂的抗菌性能提供更真实有效的 评价体系。 目前的生物膜试验常需用到恒化器，但国际上先进的恒化器系统结构复杂，本试验利用 现有的技术条件，探索建立符合国情的生物膜体外模型，以便简单快捷地进行抗菌剂抗菌性 能的测试。 由于白色念珠菌是口腔微生物的重要组分之一，是口腔常见的条件致病菌，同时白色念 珠菌ATCC1023I菌株是国际上作为消毒效果评价的标准菌株，因此本试验使用在中国市场 上较为常见的3种漱口水进行白色念珠菌ATCC10231菌株生物膜作用的体外试验。 试验结果表明，白色念珠菌在盖玻片上形成了从2h到48h正常生物膜，最开始(2h)， 白色念珠荫以单个细胞散地黏附在盖玻片上；4h后在玻片上出现了微菌落；8h后由于真菌 细胞的增殖和聚集，菌落逐渐增厚；随着时间的延长，即在24h和48h的生物膜中可以看到 云雾样的物质覆盖在菌落1-_，这些物质的主要成分主要是细胞分泌的多聚糖(细胞外基质主 要组成成分)．本试验在盖玻片上构建的几个典型时期的生物膜与Samaranayake等的文献报 ·国家摹金项目．广东有科技计捌项目(0r7I1020∞∞ls)．通讯联系人；E--m蝴：瞳蛹州参趾。血．∞ ·196· 中国化学会第14届反应性高分于学术讨论会 迸足致的，表叫止d盖玻JJ上成功建^了由色念珠蔺小物脱模制oI。 从试验结粜可咀打Ⅲ，早删的白色念珠消牛物膜对漱u水较敏堪．而巾岘驯趋向成熟的 ’L物膜th十胞外多聚物等的JB成，对谳n水rL}r较高f自执性。 鬻黼 “％：n凇粼：船怒：二：馏尹““缆：!；篇胃：粼怒i““ I胂gcswmbkenm ro埘InⅫ1瞄01。400 参考文献 R rlonJ Micmbiol 111DontanM，CosteW，Clin Rev【J】，2002，15(2)：167～193 Su动nneBI et 【21 Lup昨ns