淫羊藿苷雌激素样作用的机制的研究--对小鼠卵巢作用的组织学观察.pdfVIP

中国畜牧兽医学会中兽医分会2011年学术年会论文集 中西医结合肝病杂志， 【7】邓欣，杨大国，吴其恺，等．正肝方对黄曲霉毒素B-诱发的肝癌前病变大鼠肝功能的影响． 2008，l8(6)：357-359 【8】李俊丽，瑞琪，王辉云，等．甘草甜素等对黄曲霉毒素B1致大鼠肝癌作用的影响．癌症， 淫羊藿苷雌激素样作用的机制研究 ——对小鼠卵巢作用的组织学观察 王德海1 胡薛英2谷长勤2程国富2‘ (1、华中农业大学中兽医学教研室，武汉430070； 2、华中农业大学动物病理学教研室，武汉430070) 成分。现代药理学研究表明：ICA除能改善机体的骨骼发育和表现雄激素样作用外，还具有明显的植物 性雌激素样作用，能调整雌性动物的生殖机能。陶世英等【l】利用组织学、血清学和免疫组织化学方法研 究了淫羊藿对21日龄大鼠卵巢的作用，发现其能促进卵泡发育和雌激素受体B的表达，提高血清雌二醇 含量；ShihPW掣2】通过对6周龄SD大鼠灌服五种淫羊藿提取物中含异戊二烯基的黄酮及其类似物，取 血清后与细胞株共培养，通过检测细胞培养液后发现ICA具能明显的促进细胞株雌激素受体蛋白的表 达；张森等【3】对120日龄雌性大鼠采用皮下注射ICA的方法，发现ICAf能促进卵泡发育和有腔卵泡的形成； 而黄菊等14J通过对受孕大鼠灌胃，利用组织学和免疫组化的方法研究了ICA对8日龄内新生大鼠早期卵泡 发育和卵母细胞凋亡的影响，结果发现ICA能提高卵巢内卵母细胞比例，抑制其凋亡并延缓破裂，抑制 原始卵泡的发育启动，减少卵泡的消耗，进而增加了卵巢内原始卵泡池的储备量，该实验室随后采用腹 腔注射的方法研究了ICA对8日龄内新生大鼠卵巢卵泡发育和卵母细胞凋亡的影响，也支持了这一结论 峰J，由此可知，ICA对不同发育阶段和生殖周期大鼠的雌激素样作用不同，但目前关于ICA对性未成熟 小鼠卵巢卵泡的作用尚未见报道。同时，现代生殖免疫学研究表明，肥大细胞(mastcell，MC)在对 动物生殖系统局部免疫水平的调节过程中发挥着重要作用，与胚胎着床、妊娠、分娩及流产等过程密切 相关，现代研究发现ICA具有促进细胞免疫的作用【6l，但目前关于ICA是否可对卵巢中MC产生作用还未 可知。 因此，本试验拟对6周龄雌性小鼠灌服ICA，通过观察小鼠卵巢的组织学和超微结构，以及卵巢中 MC的数量、分布和形态的变化，研究lCA对小鼠卵巢组织的作用，从而为ICA应用于雌性动物繁殖做出 探索。 l材料 1．1药物 基金项目：华中农业大学青年教师科技创新专项(52902--0900201005)． 作者简介：王德海(197 7．一)。男，满族，湖北省武汉人，讲师，在读博士． ．通讯作蒲E-mail-cheneguofut纽ail．hzao．edu,cn 360 中国畜牧兽医学会中兽医分会2011年学术年会论文集 ICA购自陕西西安飞达生物技术有限公司，纯度为98．36％，批号为F临用前用75％乙 醇溶解，待乙醇挥发后用生理盐水稀释至5mg／ml。 1．2试验动物 具有雌激素活性药物因素的干扰，自由采食，自由饮水。 1．3仪器 分析系统(Nikon公司Nis．ElementsD型) 2方法 2．1实验设计 根据预试验结果对本试验进行设计。将100只5周龄健康SPF级昆明系小鼠饲喂无大豆小鼠饲料1 19天2组分别随机选取5只小鼠进行剖杀，选取并标注各小鼠卵巢，将左侧卵巢放入冰冷Carnoy固定 液中，进行MC观察：将右侧卵巢放入10％福尔马林固定液中，进行显微结构观察。在试验开始后第 lO、19天2组分别随机选取2只小鼠卵巢放入2．5％戊二醛固定液中，4℃固定，进行超微结构的观察。 2．2卵巢的组织学观察 将浸泡于10％福尔马林固定液中的小鼠卵巢，修整标号，制备石蜡切片，HE染色，光学显微镜进 行组织学观察，照相。 2．3卵巢MC的观察 将浸泡于冰冷Camoy固定液中的小鼠卵巢，修整标号，制备石蜡切片，乙醇脱蜡至水后，浸入甲 酸液(冰醋酸0．5ml，蒸馏水99．5m1)分化数秒钟，用吸水纸吸去多余水